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本文首次将低能离子注入技术应用于动物产酶益生菌选育上,并对离子注入诱变的分子机理进行了研究。第一章 黑曲霉 ANSO1产酸性蛋白酶学性质的研究 对黑曲霉菌株 ANSO1 产酸性蛋白酶基本酶学性质的研究表明:酸性蛋白酶适宜反应 pH 在 2.5-4.0 之间,在 pH 为 5.0 时,相对酶活最高;适宜反应温度在 40℃-50℃之间,在 45℃时,相对酶活最高;酸性蛋白酶有着较好的热稳定性,曲酶粉在 80℃保温至 5min 保留有 51.4%的酶活力,液态酶在 80℃恒温水浴中保温 60sec 保留有54.6%的酶活力,曲酶粉较液态酶有着更好的热稳定性;金属离子对酸性蛋白酶活力有一定的影响,在 2.0mmol/L 的浓度下,Mn++和 Cu++对酸性蛋白酶具有强烈的激活作用,Fe+++对该酶表现出明显的抑制作用。研究结果表明,黑曲霉菌株 ANSO1 产酸性蛋白酶可以作为饲料添加剂。第二章 低能 N+离子注入黑曲霉参数研究及突变高产菌株选育 N+离子注入黑曲霉参数研究发现:真空处理引起的低温对活细胞有明显伤害作用;孢子存活率先是随着注入剂量增加而迅速降低,当注入剂量增加到 50×2.6×1013ions/cm2 时存活率出现平缓回升,注入剂量超过 100×2.6×1013ions/cm2 时存活率又再次开始下降;注入剂量越大,孢子突变率越高,中等注入剂量（30-80）×2.6×1013N+/cm2 可引起较高的正突变率;经 N+反复注入诱变筛选,突变高产菌株 ANSO2 的酸性蛋白酶酶活由出发菌株 ANSO1的 75.8 IU.g-1提高到 602.6 IU.g-1;突变菌株 ANSO2经传 5 代培养,产酶性能稳定。试验结果提示,N+注入是一种有效的产酶益生菌选育方法。第三章 突变高产菌株 ANSO2产酶条件的研究 研究首先采用单因素搜索试验,确定最大影响因素,再利用中心组合设计原理摸索出了突变菌株最佳产酶培养基:即水 1000ml,麸皮 496.6g,豆粕 473.6g,硫酸铵29.8g;最适发酵条件的研究表明:发酵温度 30℃、发酵时间 66h、培养基 pH5.5 最适合诱变株 ANS02最大产酶。经过上述产酶条件的优化,突变高产菌株 ANSO2的酸性蛋白酶酶活可达 642.5 IU.g-1。第四章 低能 N+ 离子注入诱变分子机理研究 研究利用 RAPD 技术首次分析了离子注入微生物的 DNA 突变及其碱基突变机制,并对突变菌株的遗传稳定性进行探讨;结果表明:高产突变菌株产酶性能稳定;离子注入可以引起碱基的突变,在被测的序列中,碱基突变率为 1.09%,其中碱基置