【摘 要】
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目的：采用聚酰胺柱色谱对2,3位饱和度不同的黄酮类化合物杨梅素(Myricetin,MY)与二氢杨梅素(Dihydromyricefin,DMY)、槲皮素(Quercetin,QU)与二氢槲皮素(Dihydroquercetin,Dqu
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目的：采用聚酰胺柱色谱对2,3位饱和度不同的黄酮类化合物杨梅素(Myricetin,MY)与二氢杨梅素(Dihydromyricefin,DMY)、槲皮素(Quercetin,QU)与二氢槲皮素(Dihydroquercetin,Dqu)进行分离;研究上述化合物及山柰酚(Kaempferol,KA)对心肌细胞活力的影响及对大鼠心肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]I)的影响。
方法：以聚酰胺柱色谱作为分离手段,利用熔点测定、聚酰胺薄层色谱、紫外、红外吸收光谱进行鉴定;MTT法筛选药物浓度,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western-blot法检测easpase-3蛋白表达;应用激光扫描共聚焦显微技术,测定五种黄酮类化合物(50μmol/L)在静息状态和加入60 mmol/L氯化钾(KCl)时心肌细胞胞浆内游离钙离子的荧光强度(FI)变化。
结果：运用聚酰胺柱色谱法可一次分离得到2,3位饱和度不同黄酮类化合物;五种黄酮类化合物在50μmol/L时与模型组(100μmol/L H2O2诱导组)比较能够提高心肌细胞活力,降低心肌细胞的中caspase-3蛋白的表达,抑制心肌细胞的凋亡;静息状态下,KA和QU组能够明显降低心肌细胞内[Ca2+]I,MY能够短暂升高[Ca2+]I,而DMY和DQU对心肌细胞内[Ca2+]I无明显影响;KA、MY、DMY、QU和DQU对KCl介导的高钙有抑制作用(P＜0.05)。
结论：本研究确定了一种分离2,3位饱和度不同黄酮类化合物稳定、简便的方法;五种黄酮类化合物对心肌细胞有保护作用,其中2,3位双键的存在保护作用更强;二氢黄酮对电压依赖性钙通道(VDCC)有明显抑制作用。
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