固定化细胞酶性质及蛋白质分子可及性研究

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本文对利巴韦林酶促合成的发酵过程进行了研究,特别进行了可见光固化树脂固定化含黄嘌呤脱氢酶细胞的研究,也进行了酶蛋白分子可及性与其等电点关系的研究。 我们通过离子注入诱变获得了一株高黄嘌呤脱氢酶酶活的菌株,并采用可见光固化树脂对它进行了固定。固定化细胞黄嘌呤脱氢酶降解次黄嘌呤的最适pH为8.0,最适温度为35℃。固定化细胞黄嘌呤脱氢酶在40℃以下,pH 6.0~pH 8.0稳定。固定化细胞的黄嘌呤脱氢酶连续使用10批,平均降解次黄嘌呤99.19%,酶活力保留为94.99%。 依据PDB文库中Ribonuclease(9RAT,牛),Lysozyme(135L,鸡蛋),Pepsin(3PEP,猪),Rennin(1CMS,牛),Papain(9PAP,木瓜),Trypsin(1EPT,猪),Chymotrypsin(4CHA,牛)的晶体结构数据对它的分子可及性进行了计算和分析,探讨了蛋白质碱性氨基酸与酸性氨基酸可及性比例和蛋白质酸碱性质的关系,蛋白质碱性氨基酸与酸性氨基酸可及性比例和蛋白质等电点的关系,并且对蛋白质碱性氨基酸与酸性氨基酸可及性比例和蛋白质等电点的关系进行了线性关系检验,发现蛋白质碱性氨基酸与酸性氨基酸可及性比例和蛋白质等电点之间存在线性关系。
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