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小麦近缘种属作为改良小麦遗传组成的一个巨大基因库,蕴藏着许多有益基因。将小麦近缘种属有益(抗病、优质等)基因导入普通小麦,可以大大拓宽小麦的遗传基础,对小麦遗传理论研究和育种工作具有重要意义。
本研究以小麦抗病远缘材料偏凸山羊草与硬粒小麦杂交组合后代F1×旱优2号的高世代稳定材料BC5-2为研究对象;结合本实验室条件和实验材料的综合特点,我们本着快速、经济、准确可行的原则,对BC5-2进行形态学观察、细胞学分析、蛋白电泳、抗病性鉴定和分子标记分析,对其所含的偏凸山羊草外源种质进行鉴定。结果如下:
1.田间观察BC5-2的一些农艺性状表现较好,如分蘖力强、抗逆性强、产量稳定等;对贵州白粉病优势小种具有成株期抗性,可进一步作为转移抗白粉病基因的桥梁材料。
2.细胞学观察表明BC5-2的根尖细胞染色体数目为42、花粉母细胞减数分裂第一中期(PMCMⅠ)可正常联会成21个二价体(21Ⅱ),利用核型和改良的Giemsa-C带技术,鉴定出材料BC5-2是偏凸山羊草的代换系(偏凸山羊草的2Mv、6Mv染色体代换旱优2号6A、1B染色体);亲本旱优2号对白粉病高感,BC52对白粉病具有一定的抗性,故而偏凸山羊草2Mv或6Mv染色体上可能含有抗病基因。
3.麦谷蛋白电泳结果表明:BC5-2中含有偏凸山羊草的特殊亚基5+10+12.2;且含有所有亲本当中都没有的1亚基,该优质亚基由Glu-A1控制合成,其评分标准高于其它亚基。
4.醇溶蛋白电泳结果表明:BC5-2含有偏凸山羊草的特殊谱带γ-2、β-1;且BC5-2与偏凸山羊草都含有ω-4、ω-3、γ-2、γ-3和β-1,而其它亲本不含有这些特殊谱带,说明被导入旱优2号的Mv染色体对小麦醇溶蛋白有一定的影响,且证明了杂种后代的真实性。
5.对BC5-2及其亲本进行RAPD分析:从100个随机引物中,筛选到2个引物分别能在BC5-2、偏凸山羊草中稳定地扩增出两个引物的特异DNA片段(S2011-550和S2003-1000)。
6.对BC52及其亲本进行了SSR分析:从90对引物中,筛选到1对引物(Xgwm518)能在BC5-2、偏凸山羊草中稳定地扩增出一条特异DNA片段(Xgwm518-600bp)。证明小麦的微卫星标记引物可以在偏凸山羊草中使用,并可以鉴定出来源于偏凸山羊草的特殊遗传物质,从而扩大了小麦微卫星标记的应用范围。