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富含半胱氨酸分泌蛋白（Cysteine-rich secretory proteins，CRISPs）广泛分布于哺乳动物和非哺乳动物的组织中，在精子成熟、精卵融合、免疫防御，以及离子通道的调控等方面发挥重要作用。此外，CRISPs家族成员还在临床疾病的检测预防以及治疗等方面也显示出良好的应用前景。七鳃鳗（Lampreys）是低等的无颌类脊椎动物，能够攻击海洋中的大型鱼类，具有吸血习性。本实验室在七鳃鳗的口腔腺中发现了一种新的富含半胱氨酸分泌蛋白家族成员(Cysteine-rich buccal gland protein，CRBGP)。目前，相关于CRISPs家族成员的研究主要集中在哺乳动物和爬行动物，而七鳃鳗CRISP的生物学功能研究甚少。长久以来，七鳃鳗由于其独特的历史进化地位因而被用于研究脊椎动物的系统发育与进化。通过实时定量PCR检测结果发现，七鳃鳗CRBGP（Lamprey-CRBGP，L-CRBGP）广泛分布于七鳃鳗的心脏、口腔腺、肾脏、白细胞、鳃、肝脏和肠等组织中。经LPS抗原刺激后，L-CRBGP在七鳃鳗的心脏、口腔腺和肾脏中的表达水平明显发生上调。这提示L-CRBGP可能与七鳃鳗的营养摄取和免疫逃逸等生理过程密切相关。将七鳃鳗L-CRBGP基因构建入pGEX-4T-1原核表达载体，经IPTG诱导后在E.coli Rosetta中成功表达出可溶性的重组蛋白CRBGP（recombinant L-CRBGP，rL-CRBGP）。采用GST亲和层析法获得大量电泳纯的rL-CRBGP，分子量约为51.6kDa。此外，采用凝胶过滤层析从七鳃鳗口腔腺的分泌液中纯化出天然的CRBGP。体外实验结果表明七鳃鳗天然CRBGP和rL-CRBGP均具有抗氧化活性。MTT结果表明，天然CRBGP和rL-CRBGP蛋白均能抑制HUVEC和Hela细胞的增殖，但rL-CRBGP蛋白的抑制效果并不明显。这可能是由于重组蛋白时所选用的原核表达载体pGEX-4T-1无法对重组蛋白进行翻译后修饰而造成的。Transwell实验结果表明七鳃鳗天然CRBGP蛋白能够抑制HUVEC和Hela细胞的迁移和侵袭过程，诱导Hela细胞发生凋亡，抑制体内鸡胚尿囊膜新生血管的形成，表明七鳃鳗CRBGP具有抗血管新生的活性。对七鳃鳗CRBGP抗血管新生活性和作用机制的深入研究，不仅有助于阐明CRBGP在七鳃鳗中的生理功能，还为今后开发新型抗血管新生药物奠定了坚实的理论基础。