外源NO缓解黄瓜幼苗盐胁迫伤害的生理基础研究

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盐害是目前影响植物生产的主要限制因素之一。据报道,在世界范围内,近2.3×109hm2灌溉土地的1/3受到盐分胁迫,温室土壤的次生盐渍化也已成为国内外设施栽培中普遍存在的难题。NO是生物体中一种重要的氧化还原信号分子和毒性分子,也是一种活性氮(Reactive nitrogen species,RNS)。研究表明,NO广泛存在于植物组织中,并参与植物呼吸作用、光形态建成、种子萌发、衰老、对胁迫的响应、细胞程序性死亡(Programmed cell death,PCD)以及抗病防御反应等过程,NO与植物抗逆性特别是与植物盐胁迫间的联系是近年来的研究热点。但到目前为止,人们对NO在NaCl胁迫生理过程中的作用机理还了解不多,特别在园艺作物上的研究报道甚少。本文以黄瓜(Cucumis sativus L.)品种‘津春2号’为材料,采用水培法,通过在营养液中添加外源NO供体硝普钠(Sodium nitroprusside,SNP),结合添加NO信号传递途径关键酶鸟苷酸环化酶(cGC)抑制剂亚甲基蓝(Methylene blue,MB-1),研究了外源NO与NaCl胁迫下黄瓜幼苗植株生长、光合特性、氮代谢、抗氧化系统间的关系及Ca2+在NO信号传导中的地位和作用,探讨了NaCl胁迫下外源NO在黄瓜幼苗植株中的生理调节功能。主要研究结果如下:1.10~400μmol·L-1NO供体SNP均能缓解50mmol·L-1NaCl胁迫对黄瓜植株造成的伤害,100μmol·L-1SNP缓解效果最好,显著提高了幼苗的生长量;NO的信号传递途径关键酶cGC抑制剂MB-1抑制了NO的缓解效应。2.盐胁迫下添加外源NO提高了幼苗光合色素含量、光合速率、气孔导度、蒸腾速率,增加了渗透调节物质可溶性糖和可溶性蛋白的含量,而胞间二氧化碳浓度下降,添加NO的同时添加NO信号传递途径关键酶cGC抑制剂MB-1抑制了NO对NaCl胁迫下幼苗植株的这些作用。3.50mmol·L-1NaCl胁迫下,添加100μmol·L-1SNP明显降低了幼苗植株叶片和根系中腐胺(Putrescine,Put)、亚精胺(Spermidine,Spd)、多胺总量及多胺氧化酶(Polyamine oxidase,PAO)活性,调节了3类游离态多胺(腐胺、精胺和亚精胺)在植株内的比例,提高了精胺(Spermine,Spm)的含量和(Spd+Spm)/Put比值。4.添加100μmol·L-1SNP能显著提高NaCl胁迫下黄瓜植株叶片和根系吡咯啉-5-羧酸合成酶(P5CS)活性,而脯氨酸脱氢酶(ProDH)活性显著下降,脯氨酸(Pro)的含量显著增加,增强了黄瓜幼苗对盐胁迫的渗透调节能力。5.100μmol·L-1SNP能明显提高NaCl胁迫下黄瓜幼苗叶片和根系内NR的活性,缓解由于盐胁迫造成的NO3--N吸收量的下降,减少了NH4+-N在植株体内的过量积累。6.外源NO提高了NaCl胁迫下幼苗抗氧化保护酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性;抗氧化物质抗坏血酸(ASA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量增加,抗氧化物质代谢相关的谷胱甘肽还原酶(GR)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性提高,MB-1抑制了NO对抗氧化物质代谢的调节作用。同时,外源NO降低了NaCl胁迫下幼苗丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)的含量、超氧阴离子(O2.—)的产生速率及质膜透性。7.Ca2+可显著缓解NaCl胁迫对黄瓜幼苗生长的抑制,叶片和根系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性较单独NaCl胁迫处理显著提高,丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)的含量、超氧阴离子(O2.—)产生速率明显下降;添加NO的同时添加Ca2+通道抑制剂La3+抑制了NO的调节作用。表明Ca2+对NO诱导的Nacl胁迫下黄瓜幼苗植株活性氧清除能力的提高起关键性的辅助作用,NO的作用可能依赖于胞浆Ca2+
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