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本文通过GenomeWalkerPCR和基因组PCR,成功地获得了斜带石斑鱼PRLR基因全长和5’旁侧区673bp序列。斜带石斑鱼PRLR基因全长10199bp,包含9个外显子,8个内含子。转录起始位点位于外显子2上,转录终止位点位于外显子9上。在已获得的5’旁侧区序列上,没有TATAbox序列,但存在转录因子C/EBPβ和Sp1的结合位点,这与哺乳动物催乳素受体基因启动子Ⅲ(PⅢ)相似。
Northernblot分析表明:在斜带石斑鱼肠、鳃丝和性腺中都检测到一条2.37kb的转录产物,其在肠和鳃表达量较高,在卵巢表达量比较微弱。此外,在鳃丝中还检测到了PRLR另外两种转录产物,分别为4.62kb和1.19kb。应用两步法RT-PCR结合Southernblot分析,我们进一步研究了PRLR在斜带石斑鱼不同组织和早期发育时期的表达情况。
结果显示:在检测的组织中,PRLR都有表达。在垂体、皮肤、鳃丝中表达量最高,鳃弓、中肠、后肠、胃、性腺、脂肪表达量也较高,各脑区包括嗅球、端脑、中脑、小脑、下丘脑、延脑,和骨、肌肉、前肠、心脏、肝脏、肾脏、脾脏表达量则相对较低。在斜带石斑鱼早期发育时期,我们检测的各时期PRLR均有表达,在原肠后期,胚体形成期,心脏跳动期,和尾芽期表达量相对较高。