【摘 要】
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研究背景与目的:丙泊酚因为其起效迅速、可控性好、清醒快而完全等优点,现广泛应用于临床麻醉、ICU镇静和无痛诊疗中。但丙泊酚对心血管系统有明显的抑制作用,可导致心输出量
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研究背景与目的:丙泊酚因为其起效迅速、可控性好、清醒快而完全等优点,现广泛应用于临床麻醉、ICU镇静和无痛诊疗中。但丙泊酚对心血管系统有明显的抑制作用,可导致心输出量减少和全身血管阻力降低,从而引起低血压等不良反应。已有研究认为循环抑制可能与丙泊酚对交感神经的抑制作用及对阻力血管壁的直接扩张有关。目前对丙泊酚全麻机制的研究认为突触传递是药物发生作用的关键环节,并发现丙泊酚是通过对突触后离子通道受体的调控而起作用,但对突触前机制研究较少,有报道丙泊酚能够抑制交感神经系统分泌细胞儿茶酚胺的释放,但不能确定其是否作用于神经递质释放机制本身,针对丙泊酚影响大鼠肾上腺髓质细胞内含有儿茶酚胺类激素的致密颗粒的研究国内外未见报道。本研究采用电子显微镜镜检的方法,观察丙泊酚作用之后,大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞内致密颗粒的就位（Docking）情况,初步了解丙泊酚抑制交感神经系统分泌细胞即肾上腺髓质细胞的作用靶位是否存在于细胞内部。方法:利用DMEM完全培养基对神经内分泌PC12细胞进行传代培养。本实验分两个部分:（一）采用随机数字表法分为五组,每组培养液含丙泊酚的浓度分别为（P1）组含丙泊酚0uM、（P2）组含丙泊酚10uM、（P3）组含丙泊酚30uM、（P4）组含丙泊酚100uM、（P5）组含丙泊酚300uM,通过CCK-8实验,根据不同浓度的丙泊酚对细胞增殖能力的影响,测定不同浓度丙泊酚的细胞毒性,目的是测定30uM的丙泊酚是否有细胞毒性。（二）采用随机数字表法分为两组,丙泊酚组和对照组。丙泊酚组为含丙泊酚浓度为30uM的细胞培养液,对照组为普通细胞培养液,两组细胞培养液含有相同浓度的二甲基亚砜（DMSO）,处理完毕,将两组培养皿放入相同环境（37℃、5%CO2）培养箱中培养1小时。收集培养皿中的细胞,洗涤离心成细胞团后固定,送电镜室后期处理,取回电镜照片后通过CAD软件观察测量致密颗粒距离细胞膜的最短距离,我们根据颗粒距离浆膜的距离把致密颗粒分成6类,分别为50nm以内、50-100nm、100-200nm、200-500nm、500-1000nm及超过1000nm距离,对每个对照组和实验组的多个单细胞图像的数据（n=50）进行了整理。经过数据分析,判断丙泊酚是否对于交感神经系统分泌细胞内部致密颗粒的分布状况有影响。结果:1、丙泊酚0-300uM干预1 h对PC12细胞没有观察到明显变化（P>0.05）2、两组实验中分泌细胞内部致密颗粒的就位比率在统计学上没有明显差异（P>0.05）结论:1、丙泊酚30uM浓度不会对PC12细胞产生细胞毒性。2、丙泊酚影响交感神经系统,抑制儿茶酚胺释放,不是通过影响神经系统分泌细胞内部致密颗粒的Docking过程,可能通过其他途径。
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