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以抗寒性不同的3个葡萄品种(梅鹿辄、赤霞珠和贝达)一年生枝条叶片为材料,采用电导法测定叶片的细胞膜透性;分光光度法检测叶片中MDA含量,SOD、POD和CAT活性,O2(.)产生速率和H2O2含量;应用组织化学定位的方法研究了3个葡萄品种叶片中O2(.)和H2O2的水平;ELISA法测定了5种内源激素(IAA、ABA、GA、JA和iPA)的含量,研究低温胁迫下这些生理生化指标的变化,分析各种指标与葡萄抗寒性的关系,以期获得在葡萄生长期鉴定抗寒性的指标,为抗寒葡萄品种的选育提供理论依据。以梅鹿辄一年生枝条叶片为材料,探讨了在低温胁迫下H2O2和ABA之间的关系,为深入探明活性氧和植物激素在提高葡萄抗寒性中的作用奠定基础。试验初步得出以下结论:
1.随着温度降低,葡萄叶片的相对电导率和MDA含量随之升高,并且抗寒性强的品种贝达升幅最小,而抗寒性差的品种梅鹿辄升幅最大,表明相对电导率和MDA含量与3个葡萄品种的抗寒性关系密切。在低温胁迫下,SOD、POD和CAT的活性均随着胁迫温度的降低而升高,而且抗寒性强的品种3种酶活性增幅都大于抗寒性越弱的品种;其中SOD和POD对温度的变化较为敏感,适合作为葡萄抗寒性鉴定指标。O2(.)产生速率随低温胁迫时间的延长呈先升高后降低趋势,抗寒性强的品种贝达O2(.)的升高幅度最小,抗寒性最弱的梅鹿辄O2(.)产生速率最高,3个葡萄品种的O2(.)产生速率差异显著。叶片O2(.)组织化学定位的结果进一步证明O2(.)与葡萄品种的抗寒性具有密切关系。低温处理下3个葡萄品种叶片的H2O2含量随温度降低而增加,并且含量从高到低为梅鹿辄>赤霞珠>贝达,与3个葡萄品种的抗寒性也具有关系;对H2O2含量的组织化学定位试验,进一步明晰了H2O2含量与3个葡萄品种抗寒性的密切关系。
2.3个葡萄品种叶片中ABA和JA含量随着温度的降低明显增加,而IAA、GA和iPA随着温度降低,显著减少;IAA变化表现出品种间显著差异,与抗寒性关系密切。
3.随着处理温度降低,3个葡萄品种叶片中ABA/GA、ABA/IAA、ABA/iPA以及JA/GA、JA/IAA、JA/iPA几种激素比总体变化为先升高后降低,并且温度越低,激素比的变化幅度越大;试验结果表明,叶片中ABA/IAA和ABA/GA可以作为判断葡萄品种抗寒性的主要指标之一。
4.为进一步探讨葡萄的抗寒机制,研究了低温胁迫下梅鹿辄叶片中H2O2与ABA的相互关系。结果表明,-H2O2能引起ABA大量积累,推测,H2O2和ABA共同参与葡萄对低温胁迫的应答。