蟾蜍乳酸代谢控制分析及乳酸与NADH作用的研究

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乳酸是机体重要的中间代谢物质,本文以不同温度下培养的蟾蜍为研究对象,分析了不同组织(血清、心脏、肝脏和骨骼肌)乳酸与NADH之间的相互关系,结果表明,乳酸与NADH/NAD+比值之间具有显著的负相关性(血清k= -8.0129,R2=0.8975;心脏k= -0.9965,R2=0.8824;肝脏k=-0.3304,R2=0.7565;骨骼肌k=-2.6470,R2=0.8466),即乳酸含量高时,NADH/NAD+的比值较低,乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸的同时生成NADH以保证机体还原力的储备,维持机体氧化还原平衡。关于机体能量代谢的研究是比较重要的,本文主要研究了蟾蜍不同组织能荷的变化,发现在5、10、20℃的条件下肝脏的能荷最高,即冬眠期维持肝脏的能量供应是必须的;在25℃下蟾蜍的心脏能荷较高,即正常活动期状态下,机体对于心脏的能量供应维持高水平以保证正常的生理活动;在15和30℃的条件下,此时是蟾蜍处于高度活动状态,骨骼肌对能量的需求最高,即骨骼肌的能荷此时最高。通过能荷的研究说明了在不同温度下,蟾蜍各种组织的能荷变化,进而为蟾蜍能量代谢的研究提供基础。本文构建了蟾蜍乳酸代谢网络,获得的乳酸通量分析模型表明,心脏与肝脏的乳酸通量变化趋势相似,即在5℃和30℃各出现峰值;血清和骨骼肌的乳酸通量变化趋势比较相似,25℃出现明显的最大值。另外以温度作为扰动手段,计算基于主成分分析的控制系数Cpi,表明苹果酸脱氢酶(MDH)在四种样本中均起到负调节作用,而最大控制系数不尽相同,血清的磷酸甘油激酶(PGK,Cp PGK= 0.1186;心脏的乳酸脱氢酶(LDH,CpLDH= 0.1160;肝脏的乳酸脱氢酶(LDH,CpLDH= 0.1296;骨骼肌的己糖激酶(HK,CpHK= 0.1883)。另一方面,应用lin-log方法得到的通量控制系数CJi表明,各种组织最大控制系数包括:血清的己糖激酶(HK,CpHK= 0.1532)、心脏的醛缩酶(ALD,CpALD= 0.1732)、肝脏的丙酮酸激酶(PK,CpPK= 0.1439)以及骨骼肌的己糖激酶(HK,CpHK= 0.2641);而苹果酸脱氢酶(MDH)同样都是负值,其中心脏的6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)也起到负调控作用。最后,将两者控制系数进行对比分析,发现血清、心脏和肝脏具有显著的一致性,而骨骼肌两组控制系数的变化规律基本一致,说明采用主成分分析方法得到的控制系数比较好地反应了12种酶对于蟾蜍乳酸的代谢调控,而且新方法的使用避免了传统分析方法的难题,为研究代谢网络的控制分析提供了一种简便的分析手段。
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