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本论文利用葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的炎症性肠病(Inflammation bowel disease,IBD)小鼠模型,评价了Se-PC对C57BL小鼠急慢性结肠炎(Colitis)的缓解作用;观察了硒藻蓝蛋白(Se-PC)酶解多肽(Se-PP)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抗氧化作用;还用巨噬细胞RAW264.7研究了Se-PP调节LPS诱导的免疫炎症反应机制。主要结果如下: 1.利用饮水添加DSS成功复制小鼠急、慢性结肠炎模型,通过灌胃不同剂量Se-PC设低(L)、中(M)、高(H)剂量实验组,并设PBS模型组(DSS+)和正常对照组(DSS-)。通过检测和比较各组小鼠的体重、结肠长度、Hb含量、DAI值、和炎症介质释放水平,以及结肠组织病理切片染色观察,发现Se-PC对小鼠急、慢性结肠炎均有明显缓解实验作用,且呈明显的剂量依赖性。此外,EMSA分析发现,Se-PC明显下调炎症结肠组织中NF-κB的核转移水平,提示Se-PC通过调节NF-κB信号途径缓解Colitis炎症反应。 2.模拟胃肠道环境体外酶解Se-PC制备Se-PP,发现胃蛋白酶-胰蛋白酶-胰凝乳蛋白酶联合获得最高水解度,水解多肽抗氧化活性最强。采用tBOOH诱导HUVEC氧化损伤模型探讨了Se-PP的抗氧化活性,结果显示,Se-PP在50-200μg/mL时,对细胞氧化损伤具有明显抵抗作用,且优于不含硒藻蓝蛋白(PC)的对照酶解多肽(PP),提示硒在其中起协同作用。 3.利用小鼠RAW264.7巨噬细胞株研究Se-PP对LPS激活NF-κB和NO生成的影响。结果发现,尽管Se-PP在100μg/mL处理18 h后,对iNOS表达和NO生成有一定上调作用,但能够显著降低核内NF-κB水平,并下调RAW264.7细胞中LPS激活的iNOS表达,减少NO的释放。提示Se-PP可能通过调节NF-κB信号影响巨噬细胞天然免疫炎症反应。 综上所述,Se-PP具有抗氧化活性,对DSS诱导的小鼠Colitis症状有明显缓解作用,其作用机制与下调免疫炎症细胞如巨噬细胞的NF-κB信号有密切关系,但其调控NF-κB活化的具体分子节点仍有待深入研究阐明。