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本论文分为两章,第一章研究了角质细胞生长因子的表达及其生物学活性,第二章建立了基于报告基因的成纤维细胞生长因子受体（FGFR）抑制剂细胞筛选模型。角质细胞生长因子（keratinocyte growth factor,KGF）是Rubin等（1989）从胚胎肺成纤维细胞培养上清中发现的,这种细胞因子的靶细胞为上皮细胞,分泌细胞为各种来源的间质细胞,其作用是促进上皮细胞的生长、分化、迁移。在治疗皮肤创伤、角膜损伤、消化性溃疡及放化疗损伤防护等方面具有诱人的应用前景。本章在前人工作的基础上,主要研究了工程菌的诱导表达条件,产物发酵及纯化,产物的生物学活性,以及烫伤药制备和药效研究。对工程菌表达融合蛋白GST—KGF的条件进行研究,结果表明GST—KGF可溶表达的最佳条件为诱导温度22℃,诱导物IPTG浓度0.5mmol/L,诱导时菌体密度OD600,约为0.96,诱导时间5h。在该诱导表达条件下,摇瓶发酵实验每升发酵液GST—KGF的产量为28.39mg,占菌体总蛋白的8.66%。罐上发酵体系中的GST-KGF产量为277.8mg/L,占菌体总蛋白的29%。采用GSH-sepharose凝胶对GST—KGF蛋白进行亲和吸附,并用凝血酶切除融合蛋白N端的GST部分,最后得到电泳纯的KGF,分子量为17KD左右。在罐上发酵体系中,1L发酵液可得83.0mgKGF蛋白,总纯化率为50%。并且利用ELISA实验检测了所得KGF的免疫学活性。在上述工作的前提下,我们对KGF的生物学活性进行了研究,对小鼠背部进行深Ⅱ度烫伤,检测KGF对伤口的修复能力,最终我们确定使用浓度为10μg/创面的KGF可以很好地促进伤口的愈合。在此前提下,进一步研制了三种不同基质的KGF烫伤药,并且检测三种配方烫伤药对小鼠伤口愈合的促进作用,发现配方一的烫伤药乳膏有明显的促进伤口愈合的能力,其药效甚至比市面上的某些烫伤药还好。其愈合率与愈合同期的阳性药物相比,普遍提高了30%-50%。结果证明,所研制的配方一烫伤乳膏有良好的治疗功效,具有较好的应用前景。碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factors,bFGF）是1970年代第一次从牛的脑组织中分离出来的。同其它成纤维细胞生长因子一样,它具有有丝分裂原性。成纤维细胞生长因子具有多重的生物学活性,包括细胞的增殖、分化和迁移。它们也可以激发原癌基因诱发肿瘤的形成和发展。本文的研究内容包括FGFR（fibroblast growth factors receptor,FGFR）抑制剂稳定筛选模型的建立,利用此稳定筛选模型筛选微生物发酵粗提物,并且利用western—blot检测具有活性的粗提物对bFGF信号传导通路的影响。利用稳定转染的方法共转染pCDNA3.1（-）和pGL3-SFiRE双质粒于NIH3T3细胞,通过G418抗性和荧光素酶反应两步筛选,建立稳定的筛选模型,并得到了F10-9,A7-12,E1-9这三株pGL3-SFiRE-NIH3T3稳定细胞株。通过这个筛选模型的筛选,最终得到了191、LX、hZL02a-1、HQGa-9、Ty02b-5这5种具有抑制活性的粗提物。利用western-blot检测这些具有活性的粗提物对FGF信号传导通路中关键酶的影响以及对FGFR的抑制情况。最终发现Ty02b-5和180这两种粗提物抑制了FGFR的磷酸化,并且在对p-PLCγ的检测中发现经过这两种粗提物处理后p-PLCγ的量明显减少。说明两种粗提物中的某种成分可能是我们所寻找的bFGFR的抑制剂,并且通过PLCγ途径对bFGF的信号传导产生影响。本部分的工作是阶段性的,至于这两种粗提物中的哪种成分对FGFR存在抑制,还需要通过活性追踪实验进一步确定,他们在FGFR上的具体作用位点及作用机制也有待进一步研究。