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本实验以小鼠MⅡ卵母细胞作为受体,小鼠成纤维细胞、大鼠成纤维细胞、猪颗粒细胞作为供体细胞,构建同种和异种重构胚用来观察中心体的动态和功能。采用centrin、γ-tubulin和NuMA三种抗体来标记中心体,用α-tubulin标记微管观察微管组装。
本实验观察了RhoA在卵母细胞成熟、受精和早期卵裂中的亚细胞定位,发现RhoA定位于卵母细胞及受精卵的胞浆中,主要在排出第一极体和第两极体时的纺锤休的中体上聚集。RhoA激酶特异性抑制剂Y-27632抑制生发泡破裂(germinalvesiclebreakdown,GVBD)、极体排放、纺锤体旋转和卵裂等进程,RhoA抗体显微注射到卵母细胞或受精卵也能得到类似结果。同时观察了卵母细胞和受精卵微管和微丝的变化,发现Y-27632改变了微丝的组织形式,抑制了分裂沟的形成,但对纺锤体组装和染色体分离无影响。