Arg-Gly-Gln在断奶仔猪离体空肠中的吸收转运及其对空肠影响的研究

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为探究含有Gln的三肽(Arg-Gly-Gln)能不能被断奶仔猪肠道吸收转运及其对断奶仔猪肠道发育的影响,本研究选用28日龄断奶仔猪空肠进行离体培养,进行了三个试验。试验一研究了0.56mmol/L的Arg-Gly-Gln在断奶仔猪离体空肠外翻肠段中的水解情况,共2个处理(三肽组和对照组)。试验二对/Arg-Gly-Gln、Gly-Gln、游离Gln这三种来源的Gln在空肠外翻肠囊中的吸收转运差异作了初步研究,培养时间为40min,分为4个处理,即三肽组、二肽组、游离氨基酸组、对照组(空白Kreb’s溶液)。试验三研究了不同浓度的Arg-Gly-Gln对断奶仔猪离体空肠培养液中乳酸脱氢酶酶活、肠细胞增殖和凋亡及Gln相关代谢酶酶活的影响,分为6个处理,分别在培养液中添加0(对照组)、0.28(试验组1)、0.56(试验组2)、1.11(试验组3)、2.23(试验组4)、4.45mmol/L(试验组5)的Arg-Gly-Gln。试验一结果如下:0-40 min内,培养液中的Arg-Gly-Gln浓度逐步降低,40 min时降至最低。该结果表明:60min培养时间内,Arg-Gly-Gln未被完全水解,能以完整形式存在。试验二结果如下:浆膜液和组织样本中,三肽组Arg-Gly-Gln的浓度显著高于对照组和游离氨基酸组(P<0.05),二肽组的Gly-Gln浓度显著高于对照组和游离氨基酸组(P<0.05);三肽组Gln的吸收比率(黏膜液中Gln减少的浓度占初始浓度的比率)显著高于二肽组(P<0.05),而二肽组又显著高于游离氨基酸组(P<0.05);三肽组浆膜液中3种形式的Gln的浓度之和高于二肽组(P<0.05),而二肽组又高于游离氨基酸组(P<0.05)。以上结果表明:在断奶仔猪离体空肠对Gln的吸收转运上,Arg-Gly-Gln优于Gly-Gln,而Gly-Gln又优于Gln。试验三结果如下:与空白对照组相比,添加Arg-Gly-Gln后能降低培养液中乳酸脱氢酶的活力,但肠组织蛋白含量无显著变化;除处理组1与对照组之间差异不显著(P>0.05)外,其余几个处理组随着Arg-Gly-Gln浓度增加,BrdU阳性细胞百分比增加。培养液中Arg-Gly-Gln的浓度与BrdU阳性细胞百分比之间相关系数为0.866(P<0.01)。随着Arg-Gly-Gln浓度增加,Caspase-3阳性细胞百分比呈降低的趋势。培养液中Arg-Gly-Gln的浓度与Caspase-3阳性细胞百分比之间相关系数为-0.796(P<0.01)。对照组、处理组1、处理组2之间组织中谷氨酰胺酶和二胺氧化酶的活性差异均不显著(P<0.05)。处理组3、4、5的肠组织中谷氨酰胺酶活性分别比对照组提高了27.69%、46.15%、83.08%。处理组4和处理组5肠组织中的DAO活性均显著增加,分别比对照组提高了66.34%和110.89%。综上所述:Arg-Gly-Gln能在断奶仔猪离体培养模型中以完整形式存在,并能被断奶仔猪离体空肠以完整形式吸收转运。此外,Arg-Gly-Gln可能可通过促进断奶仔猪离体空肠谷氨酰胺的代谢来促进肠细胞增殖、抑制其凋亡,从而起到促进肠道适应的作用。
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