肝移植术后一例及其对照HCV基因变异的动态观察研究

• 作 者: 杜廷义
• 机 构: 昆明医科大学
• 出 处: 昆明医学院 昆明医科大学
• 发表日期: 2006年期
• 关键词: 肝移植 丙型肝炎病毒 高变区1 准种 序列分析

目的：通过对一例肝移植术后，使用免疫抑制剂的丙型肝炎病毒(HCV)感染复发病例及其对照——干扰素治疗后HCV感染复发者一例及正常携带者一例体内HCV基因变异的动态研究，探讨不同免疫状态对HCV基因变异的影响作用。方法：以荧光定量PCR技术筛选阳性样本并监测病毒载量的动态变化。以限制性酶切片段多态性分析方法确定样本的基因型。以单链构象多态性分析方法研究病例HCV-HVRl区准种的复杂性。以PCR产物直接测序法研究HCV-HVRl区基因序列随时间推移而发生的动态变化。结果：肝移植术后复发患者及干扰素治疗复发患者的HCV基因型均为1b型。正常携带者的两个不同时期样本先后分别为2a/3b混合感染和3b型。三个病例的病毒载量变化趋势各不相同。肝移植术后复发患者四个样本HCV-HVR．1区的准种数量为2—4条，干扰素治疗复发患者三个样本的准种数量为5—7条，正常携带者的两个样本则分别为7条和4条。肝移植术后复发患者体内的HCV-HVR1区在13个月的时间内有9个位点发生变异，其中的6个位点是非 同义变异；而干扰素治疗复发患者体内的病毒在6个月的时间内有5个位点发生变异，其一中的3个位点是非同义变异。肝移植术后复发患者体内的HCV-HVRl区的变异分布在1480.1597bp范围的118个位点中，变异位点占这一范围的7.6％，其中有两个位点发生了 往复式变异，分别是1480位的T-c-T往复变异和1559位的C-T-C往复变异。而干扰素治疗复发患者体内病毒的HCV-HVR1区的变异分布在1526-1563bp范围的38个位点中，变异位点占该范围的13.2％，未发现往复式变异。同样在1526-1563bp范围内，肝移植术后复发患者体内的HCV基因位点的变异数为3个，占7.9[％]。结论：在不同的免疫状态下，HCV病毒载量的变化趋势不同。HCV-HVR1区准种的复杂性与被感染者的免疫状态相关：即在较高的免疫状态下，其复杂性更高，在较低的免疫状态下则较低。正向免疫压力对HCV-HVRl区基因变异所起的作用主要表现在使变异位点更为集中。