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[目的]探讨大麻二酚(CBD)对外源刺激过氧化氢(H2O2)或脂多糖(LPS)诱导的皮肤成纤维细胞(HSF)衰老损伤的干预作用及可能机制。[方法]H2O2诱导的HSF细胞衰老模型:选择对数生长期HSF细胞,分为对照组、H2O2模型组(600μM H2O2诱导处理)和CBD处理组(600μM H2O2诱导处理+不同浓度CBD处理)。使用CCK-8法检测细胞活力;相应试剂盒检测ROS、CAT、SOD、MDA 和 GSH-Px;ELISA 法检测 MMP-1 和 TIMP-1 含量;RT-qPCR 检测p53、p21、p16、BCL-2、Bax、p38、COX-2 和 iNOS 的 mRNA 表达水平;Hoechst 33342染色观察细胞核染色情况。LPS诱导的HSF细胞衰老模型:选择对数生长期HSF细胞,分为对照组、LPS模型组(1μg/mL LPS诱导处理)和CBD处理组(1μg/mL LPS诱导处理+不同浓度CBD处理)。使用相应试剂盒检测ROS、CAT、SOD、MDA和GSH-Px;ELISA 法检测 IL-6、TNF-α、NF-κB p65 pS536 和 NF-κB p65 Total;RT-qPCR 检测 p53、p21、p16、BCL-2、Bax、p38、COX-2 和 iNOS 的 mRNA 表达水平;Hoechst 33342染色观察细胞核染色情况。[结果]H2O2刺激后细胞活力相对于对照组明显下降,而与模型组相比1-10μM CBD能提高细胞活力(p<0.01);CBD能抑制H2O2诱导的ROS和MDA的产生,能缓解H2O2诱导的CAT、SOD和GSH-Px活力下降(p<0.05);CBD能减弱H2O2诱导的MMP-1含量增加(p<0.05),但是对TIMP-1减少没有明显作用;0.1和0.5μM CBD能抑制H2O2诱导的p53、p21和p16 mRNA表达水平上调(p<0.01),10μM CBD能恢复BCL-2/Bax比值的下降(p<0.01);0.1和0.5μM CBD能有效抑制H2O2诱导后p38 mRNA表达水平的上调(p<0.01),0.1-10μM CBD能降低H2O2诱导的COX-2 mRNA表达水平明显上调(p<0.01);Hoechst 33342染色结果显示CBD对H2O2诱导的细胞核DNA损伤反应没有明显作用。LPS刺激后,与对照组进行比较模型组ROS和MDA产生增加、CAT和SOD活力减弱(p<0.05),而与模型组比较,CBD处理后可以减弱ROS和MDA产生并不同程度地恢复SOD活力(p<0.05);CBD能抑制LPS诱导的IL-6、TNF-α分泌增加(p<0.05)和NF-κB p65在S536位点的磷酸化水平上调(p<0.05),但是与浓度不存在量效关系;CBD可以降低LPS诱导后p38和COX-2 mRNA表达水平的明显升高(p<0.01);此外,CBD能够抑制LPS诱导的p53、p21和p16 mRNA表达水平上调(p<0.01),并且1和10μM CBD能部分恢复LPS诱导的BCL-2/Bax 比值下降(p<0.01);Hoechst 33342染色后,模型组与对照组相比荧光强度增加,但CBD对LPS诱导的DNA损伤反应没有明显缓解。[结论]1.CBD能够缓解H2O2或LPS诱导的HSF细胞氧化应激损伤和炎症反应,但是CBD的作用浓度存在一个阈值范围且有效性与应激源相关;2.在H2O2或LPS诱导的HSF细胞模型中,CBD可能通过抑制NF-κB途径及相关细胞因子的激活发挥抗炎抗氧化作用,实现抗细胞衰老;3.在H2O2或LPS诱导的HSF细胞模型中,CBD可能通过下调p53/p21和p16相关信号通路基因mRNA表达水平缓解细胞周期阻滞引发的细胞衰老。