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水果采后真菌性病害往往会造成巨大的经济损失。最常用防治水果采后病害的方法是使用化学杀菌剂,然而化学杀菌剂的长期大量使用,不仅导致水果致病菌产生抗药性,而且严重污染环境并危害人类身体健康。因此,寻找安全、无污染、高效和对人类身体健康无伤害的防治方法已迫在眉睫。目前,采用生物防治的方法,以有效拮抗微生物取代化学杀菌剂,用于水果采后病害的防治已显示出巨大的应用前景。尤其是拮抗酵母的使用已成为社会研究热点,这对于减少水果的农药残留、保护环境及保证食品安全具有重要意义。但到目前为止,人们对拮抗酵母防治水果采后病害相关机制研究还不够全面,特别是拮抗酵母处理诱导水果抗病性防御机制的研究、对水果活性氧代谢的影响研究才刚刚起步,相关机制仍需进一步的研究。
本论文采用实验室已经筛选分离并鉴定的卡利比克毕赤酵母(Pichiacaribbica)为研究对象,研究了P.caribbica对柑橘采后病害的防治效力及对果实自然腐烂率及贮藏品质的影响,并探讨了P.caribbica抑制柑橘采后病害的各种可能的生理机制。具体分为以下几个方面:(1)P.caribbica对柑橘绿霉病的抑制效果研究;(2)P.caribbica对柑橘诱导抗病性防御机制的研究;(3)P.caribbica对柑橘活性氧代谢的影响;(4)壳聚糖膜结合P.caribbica对柑橘贮藏品质和自然腐烂率的研究。
主要研究结果如下:
1.使用不同浓度的P.caribbica都能显著提高果实自身的抗病能力,从而有效控制指状青霉(Penicilliumdigitatum)引起的发病率,减少柑橘采后腐烂损失,浓度越高,效果越好,其中最佳诱导浓度为1×109cells/ml;P.caribbica能显著抑制P.digitatum的孢子萌发率及菌丝体的生长;P.caribbica在柑橘果实伤口处迅速生长繁殖,说明P.caribbica与病原菌进行营养与空间竞争。
2.用P.caribbica处理柑橘果实可以增强果实的抗病性,这可能是通过诱导柑橘防御酶活性实现的。P.caribbica能有效提高柑橘过氧化物酶(peroxidase,POD)、多酚氧化酶(polyphenoloxidase,PPO)、几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活性及提高类黄酮含量。
3.用P.caribbica处理柑橘可以诱导提高果实的超氧化物歧化酶(superoxidedistmuase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(aseorbateperoxidase,APX)及谷胱甘肽还原酶(glutathionereductase,GR)的活性,同时提高过氧化氢(hydrogenperoxide,H2O2)、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量。这说明P.caribbica诱导提高柑橘果实抗病反应中涉及活性氧代谢水平的变化。
4.P.caribbica单独处理柑橘对其失重率、可溶性固形物、硬度和出汁率影响不大,同时能抑制柑橘自然腐烂;壳聚糖膜结合P.caribbica处理柑橘能有效提高柑橘的品质,并且对柑橘自然状况下病害的发生有显著的抑制作用;另外,壳聚糖对P.caribbica的生长量影响不大。说明P.caribbica在柑橘采后保鲜中有一定的效果,而与壳聚糖膜结合处理,能显著提高其拮抗效力。