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第一部分利用卵巢切除小鼠模型研究抗骨质疏松症中药的作用及机制 目的：利用卵巢切除骨质疏松症小鼠模型，以阿仑膦酸钠（福善美）为阳性对照，研究中药仙灵骨葆抗骨质疏松症的作用及机制。 方法：40只2月龄129SV品系雌性小鼠随机分为四组：卵巢假切+安慰剂组(SHAM+NS，0.2 ml*d-1)；卵巢切除+安慰剂组(OVX+NS，0.2 ml*d-1),卵巢切除+阿仑膦酸钠组(OVX+ALEN，0.2 m h d—1)，卵巢切除+仙灵骨葆组(OVX+XLGB，500 mg*kg-1*d-1),分别治疗8周和12周后处死取材，应用Micro-CT检测小鼠骨密度(BMD)和骨小梁结构、组织病理切片观察骨形态变化、三点弯曲试验和压缩试验检测小鼠股骨和腰椎骨生物力学指标。ELISA方法测定血清雌二醇含量及OPG和RANKL蛋白表达水平。Real-time PCR方法检测胫骨OPG和RANKL mRNA的表达水平。 结果：Micro-CT检测股骨B M D，喂药8周时，OVX+NS组BMD(574.0±21.7 mg/cm2)低于SHAM+NS组8％(622.7±13.7 mg/cm2)，差异有统计学意义（P<0.01)，与OVX+NS组相比，OVX+ALEN组（609.8土28.2 mg/cm2)提高6%（P<0.05)，OVX+XLGB组（597.9±27.2 mg/cm2)提高了4%(P>0.05)。喂药至12周，OVX+NS组BMD(498.6±13.0mg/cm2)较SHAM+NS组(636.5±12.4 mg/cm2)下降22%(P<0.01),与OVX+NS组相比较，OVX+ALEN组BMD(610.6±13.9 mg/cm2)提高了22%(P<0.05)，OVX+XLGB组(561.0土18.6 mg/cm2)提高了13%(P<0.05)。随着治疗时间的不同，OVX+NS组股骨和腰椎骨小梁结构及骨生物力学指标均显著低于SHAM+NS组(P<0.05)。给予仙灵骨葆和阿仑膦酸钠治疗12周后，骨小梁结构显著改善（P<0.05)，骨生物力学指标显著提高（P<0.05)。血清和胫骨OPG和RANKL蛋白水平与OVX+NS组相比明显增高(P<0.05)，但不增加血清雌二醇水平（P>0.05)。 结论：仙灵骨葆能够显著提高卵巢切除小鼠的骨密度，改善骨微结构破坏，提高骨生物力学参数且能够上调血清和骨组织骨保护素(Osteoprotegerin，OPG)的表达水平。 第二部分利用OPG基因剔除小鼠模型研究抗骨质疏松症中药的作用及机制 目的：利用OPG基因剔除骨质疏松症模型小鼠，以阿仑膦酸钠（福善美）为阳性对照，研究仙灵骨葆在抗骨质疏松症中的疗效及作用机制。 方法：12只129SV小鼠，40只O T O基因剔除小鼠（雌雄各半），随机分为四组：野生型小鼠（WT)+安慰剂组(WT+NS，n=12)，OPG基因剔除小鼠（KO)+安慰剂组(KO+NS，n=12)；OPG基因剔除小鼠+阿仑膦酸钠组(KO+ALEN，0.2 mg.kg-1.d-1，n=12)；OPG基因剔除小鼠+仙灵骨葆组(KO+XLGB，500 mg.kg-1.d-1，n=16)，持续治疗12周后处死取材，Micro-CT检测小鼠股骨及腰椎骨密度（BMD)及骨小梁结构，病理切片观察骨形态，三点弯曲实验和压缩实验检测股骨和腰椎骨生物力学指标，ELISA方法测定血清OPG和 RANKL蛋白表达水平，Real-time PCR方法测定胫骨RANKL表达水平。 结果：持续喂药12周后，KO+NS组B M D(634.35±66.28 mg/cm2)较 WT+NS组(366.69±67.81 mg/cm2)显著下降42%，骨小梁结构显著破坏，骨生物力学指标显著降低；给予仙灵骨葆治疗12周后，KO+XLGB组BMD(369.42±36.66 mg/cm2)、骨小梁结构和骨生物力学指标与K O+N S组相比较无显著变化(P>0.05)。阿仑膦酸钠皮下注射12周后，KO+ALEN组BMD(616.03±51.31 mg/cm2)与KO+NS组比较提高68%，差异有统计学意义(P<0.01)，骨小梁结构显著改善（P<0.01)，骨生物力学指标显著提高（P<0.01)。ELISA检测血清OPG蛋白表达水平显示WT组 OPG蛋白水平为2.71±0.25 ng/ml，KO小鼠血清中无OPG蛋白表达。与KO+NS组相比，KO+XLGB组血清和骨组织中RANKL表达水平无显著变化（P>0.05)，KO+ALEN组RANKL水平显著增高(P<0.01，P<0.05)。 结论：中药仙灵骨葆在OPG基因缺失时，不能发挥对骨密度、骨小梁结构和骨生物力学指标的改善作用。