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小球藻为药食同源的藻类植物，其多糖具有加速排毒、平衡酸碱、增强免疫等作用。但由于原料种类繁多、多糖结构复杂、纯化技术差异大等原因使得小球藻多糖的特性尚未完全探明。此外，相关产品仍存在腥味浓、难吞咽、口味不佳等问题。为此，本研究利用复合酶提取小球藻粗多糖，分离纯化后采用不同技术揭示纯化多糖组分间的差异，并研究小球藻多糖口服液的制备工艺与性质。主要研究结果如下:
1.优化了小球藻粗多糖的提取工艺参数。在单因素试验基础上设计响应面试验，并进行验证。结果表明，pH、酶解温度、液料比、复合酶添加量对粗多糖得率的影响程度依次降低。确定的较优提取条件为:液料比20∶1mL/g、复合酶添加量1.45％、pH为5、酶解温度39℃，在此条件下粗多糖得率可达6.56％。
2.分析了小球藻粗多糖的分离纯化工艺。Sevage脱除粗多糖中的蛋白后，经浓缩、透析、冻干即可获得多糖F。分别以蒸馏水与氯化钠为洗脱剂，进行阴离子交换柱层析可获得3种不同组分的纯化多糖F1、F2、F3。紫外扫描与葡聚糖凝胶柱层析分析，表明纯化多糖几乎不含蛋白质、氨基酸及核酸等，且接近为均一性多糖。
3.探索了小球藻多糖的基本组成、结构性质、理化性质及抗氧化活性。基本组成测定结果表明:多糖F1、F2与F3的得率分别为4.02％、51.91％、9.53％，其中F2为淡黄色絮状物，其余均为乳白色蓬松物。与糖醛酸含量为7.43％的多糖F相比，纯化多糖的糖醛酸含量均有所降低，但总糖含量均显著提高，其中F1的总糖含量最高为73.47％，同时F3也含有18.22％的硫酸根。另外，通过GPC分析发现，F1、F2、F3的Mw依次增加，分别为27.15KDa、1.058×103KDa、5.576×103KDa。
应用SEM、HPLC、FT-IR及刚果红试验对小球藻多糖的结构性质进行系统表征，结果表明:F1为细丝状，主要包含62.90％Gal、15.44％Glu和12.67％Man等单糖成分;F2呈三维网状结构，以41.85％Gal、13.74％Fuc和10.20％Rha为主要单糖;不同的是类似于F的多糖F3以片状堆积为主，由39.55％Ara、32.33％Rha与10.82％Gal组成。小球藻多糖均含有包括O-H、C-H、C=O等官能团在内的多糖特征性吸收峰，但仅F3含有α-吡喃糖。纯化多糖的水溶液均不呈现三股螺旋构象。
将热重分析与流变分析应用于纯化多糖的理化性质研究中，数据显示:温度低于180℃时，多糖的热性质比较稳定;多糖展示出剪切变稀行为，且F2与F3浓度依赖性强于F1，意味此多糖为非牛顿流体;多糖呈现出固体的弹性行为，且储能模量(G)始终大于损耗模量(G”)，证明此多糖为非凝胶型多糖。抗氧化活性分析明确，F1对ABTS+·与·OH的清除能力较强，而F2具有较高的DPPH·与O2-·清除活性。
4.研究了小球藻多糖口服液的制备工艺及性质。以多糖保留率、透光率和感官评定为指标，采用正交试验确定较优工艺参数为:脱腥剂（β-环状糊精）添加量27.5mg/mL，澄清剂（Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂）添加量3％A、6％B，每15mL多糖澄清液中添加750mg蜂蜜、75mg白砂糖、15mg柠檬酸。基本性质分析表明，此口服液具有较高的清除自由基的能力，且随剂量的增加抗氧化活性均有所增加。
1.优化了小球藻粗多糖的提取工艺参数。在单因素试验基础上设计响应面试验，并进行验证。结果表明，pH、酶解温度、液料比、复合酶添加量对粗多糖得率的影响程度依次降低。确定的较优提取条件为:液料比20∶1mL/g、复合酶添加量1.45％、pH为5、酶解温度39℃，在此条件下粗多糖得率可达6.56％。
2.分析了小球藻粗多糖的分离纯化工艺。Sevage脱除粗多糖中的蛋白后，经浓缩、透析、冻干即可获得多糖F。分别以蒸馏水与氯化钠为洗脱剂，进行阴离子交换柱层析可获得3种不同组分的纯化多糖F1、F2、F3。紫外扫描与葡聚糖凝胶柱层析分析，表明纯化多糖几乎不含蛋白质、氨基酸及核酸等，且接近为均一性多糖。
3.探索了小球藻多糖的基本组成、结构性质、理化性质及抗氧化活性。基本组成测定结果表明:多糖F1、F2与F3的得率分别为4.02％、51.91％、9.53％，其中F2为淡黄色絮状物，其余均为乳白色蓬松物。与糖醛酸含量为7.43％的多糖F相比，纯化多糖的糖醛酸含量均有所降低，但总糖含量均显著提高，其中F1的总糖含量最高为73.47％，同时F3也含有18.22％的硫酸根。另外，通过GPC分析发现，F1、F2、F3的Mw依次增加，分别为27.15KDa、1.058×103KDa、5.576×103KDa。
应用SEM、HPLC、FT-IR及刚果红试验对小球藻多糖的结构性质进行系统表征，结果表明:F1为细丝状，主要包含62.90％Gal、15.44％Glu和12.67％Man等单糖成分;F2呈三维网状结构，以41.85％Gal、13.74％Fuc和10.20％Rha为主要单糖;不同的是类似于F的多糖F3以片状堆积为主，由39.55％Ara、32.33％Rha与10.82％Gal组成。小球藻多糖均含有包括O-H、C-H、C=O等官能团在内的多糖特征性吸收峰，但仅F3含有α-吡喃糖。纯化多糖的水溶液均不呈现三股螺旋构象。
将热重分析与流变分析应用于纯化多糖的理化性质研究中，数据显示:温度低于180℃时，多糖的热性质比较稳定;多糖展示出剪切变稀行为，且F2与F3浓度依赖性强于F1，意味此多糖为非牛顿流体;多糖呈现出固体的弹性行为，且储能模量(G)始终大于损耗模量(G”)，证明此多糖为非凝胶型多糖。抗氧化活性分析明确，F1对ABTS+·与·OH的清除能力较强，而F2具有较高的DPPH·与O2-·清除活性。
4.研究了小球藻多糖口服液的制备工艺及性质。以多糖保留率、透光率和感官评定为指标，采用正交试验确定较优工艺参数为:脱腥剂（β-环状糊精）添加量27.5mg/mL，澄清剂（Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂）添加量3％A、6％B，每15mL多糖澄清液中添加750mg蜂蜜、75mg白砂糖、15mg柠檬酸。基本性质分析表明，此口服液具有较高的清除自由基的能力，且随剂量的增加抗氧化活性均有所增加。