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目的:构建COX-2shRNA真核表达载体研究沉默COX-2是否通过神经酰胺信号通路参与HSC-T6增殖的调节。方法:1.将构建的pYr-1.1COX-2shRNA质粒通过LipofectamineTM2000转染入HSC-T6,荧光显微镜下观察转染效率。2.设置HK组、COX-2shRNA组,MTT比色检测HSC-T6增殖,AnnexinⅤ/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期。3.设置HK组、COX-2shRNA组、HK+FB1组、COX-2shRNA+FB1组,运用RT-PCR检测各组细胞COX-2、LASS2、a-SMA基因的表达,MTT检测FB1对沉默COX-2后HSC-T6增殖的影响。结果:1.COX-2shRNA转染HSC-T6后48h,在荧光显微镜下细胞中的细胞质可见绿色荧光,转染效率达70%以上。2.MTT测出HK组、COX-2shRNA组细胞的OD490光吸收值以及绘制的生长曲线,COX-2shRNA组在72h时光吸收值与HK组相比有统计学意义（P<0.05）。3.AnnexinⅤ/PI流式细胞分析法检测细胞凋亡发现COX-2shRNA组相较HK组细胞凋亡明显增高（P<0.05）,有统计学意义。4.流式细胞仪检测细胞周期发现COX-2shRNA组相较HK组的%G1有所增高（P<0.05）,有统计学意义。5.RT-PCR结果示与HK组比较,COX-2shRNA组COX-2、α-SMA基因表达下调（P<0.01）,LASS2基因表达上调;HK+Fumonisin B1组COX-2、α-SMA基因表达明显上调（P<0.01）,LASS2基因表达下调;与COX-2shRNA组比较,COX-2shRNA+FB1组COX-2、α-SMA基因表达上调（P<0.01）,LASS2基因表达下调;MTT测出各组细胞的OD490光吸收值,COX-2shRNA组在72h时光吸收值与HK组相比有统计学意义（P<0.05）。COX-2shRNA+FB1组光吸收值在48h、72h时与COX-2shRNA组相比有统计学意义（PP<0.05）。结论:沉默COX-2能够抑制HSC-T6的增殖,该抑制作用能够被神经酰胺合成酶抑制剂Fumonisin B1逆转,提示沉默COX-2可能通过影响神经酰胺信号通路来抑制肝星状细胞增殖。