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第一部分小鼠乳腺癌细胞淋巴结转移模型的建立目的:探讨建立小鼠乳腺癌细胞淋巴结转移动物模型的实验方法。方法:采用BALB/c裸鼠爪垫皮下注射4T1(小鼠乳腺癌)细胞的方法建立小鼠乳腺癌淋巴结转移结模型,建模后第30天收集爪垫移植瘤、腘窝等部位淋巴结以及肝脏等远端内脏组织,切片后进行HE染色,判断淋巴结转移模型建立的成功与否。结果:HE染色证实淋巴结有弥漫性癌细胞转移浸润,在10只受试裸鼠中,10只建模成功,转移率为100%。结论:BALB/c裸鼠爪垫皮下注射4T1细胞可成功建立小鼠乳腺癌细胞淋巴结转移模型。此模型构建方法快速简便、转移集中、转移率高,为研究肿瘤淋巴结转移机制、药物干预等抗转移治疗提供了理想的动物模型。第二部分淋巴结转移模型在体生物发光成像的研究目的:采用荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞(4T1-Luc)建立淋巴结转移模型,利用小动物活体荧光成像系统无创、实时、连续地监测小鼠乳腺癌细胞的淋巴结转移,建立肿瘤淋巴结转移的影像学评估方法。方法:将表达荧光素酶的4T1-Luc接种至裸鼠爪垫皮下建立爪垫淋巴结转移模型,通过小动物活体荧光成像系统连续观察肿瘤细胞在淋巴结中的转移情况,第24天处死小鼠,并将爪垫原发灶、腘窝淋巴结以及发生转移的远处脏器进行HE染色及镜检评价转移。结果:利用BALB/c裸鼠建立了小鼠乳腺癌细胞淋巴结转移模型,活体荧光成像系统观察发现,爪垫原发灶肿瘤体积与生物发光强度呈正相关性,爪垫接种第6天就可检测到一级腘窝淋巴结的肿瘤转移,第12天腘窝淋巴结转移率100%,并且生物发光强度随时间推移而增强。第24天脱颈处死裸鼠,HE染色发现腘窝淋巴结有弥漫性癌细胞浸润,肝脏部位有癌细胞转移灶。结论:利用荧光素酶标记的小鼠乳腺癌细胞成功建立了爪垫淋巴结转移模型,该模型可采用生物发光实现肿瘤淋巴转移的在体实时监控,为研究肿瘤淋巴转移机制以及抗肿瘤药物提供了良好的实验平台和影像学评估方法。第三部分生物发光成像评价X射线定向放疗效果目的:运用生物发光技术评估X射线定向照射治疗小鼠乳腺癌肿瘤淋巴结转移早期的放疗效果。方法:将有早期淋巴结转移的4T1-Luc爪垫荷瘤裸鼠按随机数表法分为对照组和治疗组:对照组不做处理;治疗组对爪垫移植瘤和腘窝转移淋巴结每次分别给予5Gy和3Gy的剂量照射,每隔1天照一次,共照射4次。通过小动物活体荧光成像系统监测放疗前后肿瘤的生长情况和肿瘤细胞在淋巴结中的转移情况。肿瘤生长第24天处死小鼠,两组分别取移植瘤、腘窝淋巴结以及远端转移肝组织,组织切片观察评价病理形态学变化。结果:X射线治疗后,治疗组移植瘤生物发光强度增加较对照组明显减弱,抑瘤率高达95%以上。此外,X射线照射具有明显的抑制肿瘤远处转移的作用。HE染色病理观察到治疗组较对照组移植瘤坏死明显。结论:运用生物发光技术获取肿瘤淋巴结转移的影像学特征,能够动态、客观、灵敏、可视化地评估X射线对小鼠乳腺癌肿瘤的治疗效果。