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研究目的:胶质瘤是成人最常见的脑肿瘤之一,同时也是死亡率最高的恶性肿瘤之一。尽管术后给予规范的个体化放疗和化疗等综合治疗,但由于其快速增殖、具有高度侵袭潜能及对放疗、化疗的耐受,胶质瘤患者的预后仍较差,其中多形性胶质母细胞瘤的平均生存期只有14.6个月。越来越多的证据表明,长链非编码RNA(lncRNA)的异常表达与恶性肿瘤的发生、发展、复发、预后等密切相关。lncRNA是一类长度超过200nt的非编码RNA,通过上调或下调其表达可以在表观遗传学水平、转录水平、转录后水平等影响基因的表达。据报道,lncRNA-MALAT1在多种人类恶性肿瘤中存在异常表达,并能通过相关的信号通路发挥致癌基因的作用。然而,关于lncRNA-MALAT1在人脑胶质瘤中的表达水平、功能研究及可能的影响机制的报道极少。因此,我们使用实时荧光定量PCR比较了lncRNA-MALAT1在人脑胶质瘤和非瘤脑组织中的表达差异,随后进一步探索了其对人脑胶质瘤增殖、侵袭能力的影响及相关机制。研究方法:(1)我们收集了苏州大学附属第一医院神经外科2010年3月至2013年4月手术切除的胶质瘤组织标本132例及非瘤脑组织20例,通过实时荧光定量PCR检测比较了lncRNA-MALAT1在胶质瘤组织及非瘤脑组织中的表达水平;(2)以慢病毒为载体,在胶质瘤细胞株U87和U251中上调或下调MALAT1的表达水平;(3)在胶质瘤细胞株中改变MALAT1的表达水平后,采用CCK-8试验、免疫组化检测ki-67表达水平、流式细胞周期检测来评估MALAT1表达改变对胶质瘤细胞增殖能力的影响;采用Transwell实验、明胶酶谱实验评估MALAT1表达改变对胶质瘤细胞侵袭能力的影响;同时,采用western blotting检测MMP2、MMP9等与侵袭相关蛋白的表达水平(4)将过表达MALAT1的U87细胞株及其阴性对照组在裸鼠皮下接种,比较成瘤组织的大小;同时将上述俩组细胞在裸鼠颅内接种,通过免疫组化检测ki-67及MMP2的表达水平,以评估malat1过表达对肿瘤增殖、侵袭能力的影响,并且我们进一步统计了颅内接种裸鼠的生存曲线。(5)提取过表达及低表达malat1的u87、u251细胞的蛋白,通过westernblotting,在肿瘤相关的信号通路中筛选出malat1异常表达后影响最明显的一条通路。结果:(1)qrt-pcr结果显示:lncrna-malat1在人脑胶质瘤组织中的表达显著低于非瘤脑组织,其结果具有统计学意义(p<0.01);在不同级别的胶质瘤组织中表达无显著差异(p>0.05)。(2)cck-8实验、免疫组化检测ki-67表达实验、流式细胞周期检测实验的结果表明低表达malat1能促进胶质瘤细胞的增殖,而过表达malat1能抑制胶质瘤细胞的增殖;transwell实验及明胶酶谱实验结果表明低表达malat1促进胶质瘤细胞株的侵袭,反之亦反;westernblotting结果显示,在胶质瘤细胞株中malat1的异常表达主要影响的侵袭相关蛋白是mmp2。(3)体内实验中,malat1过表达使裸鼠皮下成瘤组织生长减缓,使裸鼠颅内成瘤组织ki-67及mmp2表达水平降低。同时,malat1过表达的u87细胞株接种于裸鼠颅内后其生存时间较其阴性对照组延长。(4)westernblotting结果显示:在胶质瘤细胞株中,malat1的异常表达对erk/mapk信号通路影响最显著,其主要是通过影响该信号通路中p-erk的表达水平来调控该通路的活性。结论:lncrna-malat1在胶质瘤标本中的表达比非瘤脑组织中的表达低,其结果具有统计学意义,而在不同级别的胶质瘤组织中其表达水平无显著差异;在胶质瘤细胞株u87、u251中,lncrna-malat1主要是通过erk/mapk信号通路抑制肿瘤细胞的增殖和侵袭,发挥类似抑癌基因的作用。