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目的:本实验通过观察腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠结肠粘膜和下丘脑内5-HT、ET-1、i-NOS表达，以及大鼠结肠粘膜肥大细胞以及炎性细胞因子IL-10、IL-1β表达量的变化，研究脑-肠轴在D-IBS发病中可能发挥的作用；同时观察温中健脾方对上述指标的干预作用，旨在探讨温中健脾方改善大鼠D-IBS的作用机制。
方法:SPF级雄性Wistar大鼠48只，随机分为正常组、模型组、中药(温中健脾方)组及西药(得舒特)组共4组，每组12只。用传统的束缚-制动应激刺激和番泻叶灌胃方法联合建立具有脾虚证表现的腹泻型肠易激综合征大鼠模型。造模后第15天开始给药进行干预，第29天处死。采用免疫组化、ELISA方法分析模型大鼠结肠粘膜及下丘脑内5-HT的表达；采用免疫组化、RT-PCR技术，从蛋白质表达和基因转录水平定性定量分析模型大鼠结肠粘膜及下丘脑内ET-1、i-NOS的变化；采用甲苯胺蓝染色法检测大鼠结肠粘膜内肥大细胞，免疫组化方法检测结肠黏膜IL-1β、IL-10的表达。
结果:结肠粘膜HE染色结果显示:结肠粘膜完整，仅中药组和西药组各有一只大鼠可见粘膜下小血管轻度扩张外，未见明显器质性损害及炎性细胞浸润。免疫组化和ELISA检测结果显示:模型组大鼠结肠粘膜及下丘脑内5-HT较正常组明显升高，经药物干预后，5-HT较模型组明显降低，以西药组下降尤为显著(P<0.01)并接近正常水平；免疫组化和RT-PCR检测结果显示:模型组ET-1及i-NOS较正常组明显升高(P<0.001)；经药物干预后，两组ET-1均较模型组明显降低(P<0.001)，而i-NOS无显著变化，中药组与西药组之间比较，ET-1无显著变化，西药组i-NOS较中药组有明显下降(P<0.05)。肥大细胞甲苯胺蓝染色结果显示:模型组大鼠结肠粘膜肥大细胞数目较正常组明显增多，细胞面积增大，周长增加，圆度变小，等效直径增大，药物干预后肥大细胞数目有所下降，细胞面积明显减小，周长缩短，圆度有所增大，等效直径减小，差异有统计学意义(P<0.05)；中药组及西药组比较上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。模型组、大鼠结肠黏膜内IL-1β与正常组比较有降低趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；模型组较正常组明显降低(P<0.05)，经温中建脾方干预后，中药组大鼠结肠粘膜IL-10较模型组明显升高(P<0.01)，并接近正常组水平。
结论:温中健脾方可以降低模型大鼠结肠粘膜及下丘脑内5-HT、ET-1及i-NOS表达；减少模型大鼠结肠粘膜内肥大细胞数目，并能抑制肥大细胞活化脱颗粒，增加粘膜局部IL-10的表达。本实验结果表明，温中健脾方治疗腹泻型肠易激综合征的机制涉及到脑-肠轴调控机制中的多个环节。