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器官移植是治疗器官功能性衰竭的首选方法。由于供体的紧缺,器官移植的手术难以在临床实施。开展异种器官移植与异种生物材料及产业化研究,将能够满足临床上优质生物材料需求与有效缓解器官移植供体严重短缺现状的需要。本课题围绕异种器官移植的免疫排斥相关内容进行了研究。主要结果如下: 1.设计了一种基于ATP核酸适配体具有变构效应的荧光标记DNA探针,利用核酸外切酶Ⅲ的剪切产物对ATP核酸适配体的再结合进行信号放大,成功的达到了提高检测体系灵敏度的目的。该探针不同于以往利用释放靶标以进行信号放大的策略,首次针对酶解产物释放出更多的dAMP来进行信号放大,可起到指数放大效果,极大的提高了信号放大的水平和对ATP检测的灵敏度。这一设计方法有潜力应用于更多的基于核酸适配体的ATP检测系统。同时,实验证实该方法具有高度的特异性,不易受蛋白干扰,可应用于异种器官移植术后免疫状态的监控。 2.利用测序技术,对促血管生成素1(Ang1)、促血管生成素2(Ang2)对猪动脉内皮细胞的保护作用机制进行探讨。测序结果中,Ang1处理组共有118个上调基因,91个下调基因;Ang2处理组共有115个上调基因,120个下调基因。Ang1的基因变化主要集中于转录、蛋白转运、线粒体、还原型辅酶1脱氢酶活性、ATP酶活性、核糖体、代谢途径、氧化磷酸化等信号通路;Ang2的基因变化主要集中于ATP合成、转录、DNA重组与结合、线粒体呼吸链、还原型辅酶1脱氢酶活性、核苷酸结合、代谢途径等信号通路。利用实时定量PCR证明测序结果可信。差异基因蛋白间相互作用网中,Ang1处理组与核糖体蛋白作用网、氧化磷酸化过程相关、异柠檬酸盐及异丙基苹果酸脱氢酶相关。Ang2处理组与氧化磷酸化过程、免疫系统、核糖体蛋白作用网相关。本研究对于了解Ang1与Ang2对PIEC的作用有所帮助。