【摘 要】
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肿瘤是目前人类的多发病，其死亡率仅次于心血管疾病。肿瘤的发生与细胞内原癌基因有密切的关系，肿瘤的形成多伴随着原癌基因表达产物的增多。Cripto-1，也称为畸胎瘤衍化生长因子
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肿瘤是目前人类的多发病，其死亡率仅次于心血管疾病。肿瘤的发生与细胞内原癌基因有密切的关系，肿瘤的形成多伴随着原癌基因表达产物的增多。Cripto-1，也称为畸胎瘤衍化生长因子(teratocarcinoma-derived growth factor-1，TDGF-1)，发现于1987年，是从未分化的人畸胎瘤细胞NTERA2细胞系cDNA文库中钓取并鉴定的基因。Cripto-1蛋白内部具有标志性EGF-CFC功能结构域，可与细胞表面多种受体结合行使功能。Cripto-1可作为辅助因子参与TGF-β家族成员的多个细胞信号通路的传递过程，还参与活化多条控制细胞增殖与凋亡能力的信号通路。Cripto-1的生物学作用有很多，包括胚胎发育中原肠胚的形成，哺乳动物乳腺发育和乳蛋白表达，血管发生等。Cripto-1与肿瘤有极高的相关性，在多种癌细胞和组织中有异常高的表达水平，而在正常的细胞系中则表达量很低或不表达。Cripto-1在肿瘤细胞的形成、恶变及转移过程中起作用、是公认的原癌基因。
本研究首先将Cfipto-1的功能区，即EGF-CFC结构域基因克隆入原核表达载体，进而对目的蛋白进行原核表达，在对表达条件进行优化后对表达产物进行了分离、纯化和复性。并进一步用纯化的蛋白免疫新西兰兔获得兔源多克隆抗体。之后应用此多克隆抗体对多种人源的肿瘤细胞及正常细胞系中Cripto-1的表达进行了检测。本研究为进一步探讨Cfipto-1的生物学功能及以Cfipto-1为靶点的肿瘤诊断试剂的研发奠定了物质基础。
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