果蝇幼虫机械感受的研究

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本文主要从以下几个部分展开论述:  第一部分:PPK26在果蝇幼虫的伤害性机械感受中发挥重要的功能  机械感受包括听觉、触觉、本体感觉及机械痛觉等,对动物的生存至关重要。但是机械转导的分子机制才刚刚开始被解析。在果蝇幼虫中,第四类树突分支感觉神经元是多模态伤害性刺激感受器。通过Gal4/UAS双表达系统发现,DEG/ENaC家族的一个成员ppk26,特异地表达在第四类树突分支感觉神经元中。免疫组织化学染色显示内源PPK26蛋白定位于第四类树突分支感觉神经元的树突及胞体的细胞膜上,但是不定位于神经元轴突上。行为学研究提示ppk26特异地参与伤害性机械感受,而不影响伤害性热感受。之前的研究发果蝇幼虫有两条伤害性机械感受通路,ainless和piezo在同一条通路中发挥功能,而ppk1(也称ppk)存在于另外一条并行的通路中。通过遗传相互作用研究发现ppk26特异地参与ppk1通路,而不影响piezo通路的作用。进一步的免疫组织化学染色结果发现PPK26和PPK1的细胞膜定位是相互依赖的,但Piezo对PPK26及PPK1的细胞膜定位没有影响。这些结果提示PPK26和PPK1很可能形成异聚体形式的DEG/ENaC离子通道,在第四类树突分支神经元中介导机械转导。  第二部分:TMC在果蝇幼虫爬行运动中的功能研究  外周的感觉信号输入对于节律运动的调节是很重要的。在果蝇幼虫中,双极树突神经元及第一类树突分支神经元参与反馈调节幼虫的节律运动,但是人们对其分子机制的了解还不是很清楚。在本工作中,我们揭示了果蝇tmc基因表达在气管树突神经元、双极树突神经元、第一类及第二类树突分支神经元中。行为学研究发现,tmc参与调节幼虫的节律运动。与野生型果蝇幼虫相比,tmc突变体幼虫展现出异常的头部卷曲以及过多的后退运动,并且这些行为缺陷可以通过在tmc突变体中表达TMC蛋白而回复。进一步的研究发现,tmc不影响幼虫的爬行速度。目前我们正在研究的是:TMC的内源表达模式,鉴定表达tmc的参与调节幼虫节律运动的外周感觉神经元的类型,以及TMC是否是机械转导离子通道的孔道形成亚基。
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