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目的:在前期复方中药改善骨细胞系功能，促进骨形成等前期研究工作的基础上，采用人脐静脉来源内皮细胞/人成骨细胞共育细胞模型，观察不同中药调控共育系内RANKL/OPG通路表达的差异，研究补肾、益气、活血不同中药干预血管形成/骨形成耦联的作用差异。
方法：分别选择淫羊藿、黄芪和丹参为补肾药、益气药和活血药的代表，MTT法检测不同中药对人成骨细胞、人脐静脉来源内皮细胞和共育系中人脐静脉来源内皮细胞/成骨细胞(1:1)增殖的影响。实时荧光定量PCR法检测不同中药促进三种培养细胞系内OPGmRNA、RANKLmRNA的表达。In-cellwesternblot方法检测中药干预三种培养细胞系内OPG和RANKL蛋白的表达。
结果：(1)细胞增殖能力研究结果，黄芪可以促进人脐静脉内皮细胞的增殖，丹参抑制人脐静脉内皮细胞的增殖，淫羊藿促进人脐静脉内皮细胞的增殖;黄芪促进人成骨细胞的增殖，丹参抑制人成骨细胞的增殖，淫羊藿可以促进人成骨细胞的增殖。在共育系内，在有人脐静脉内皮细胞存在的情况下，人成骨细胞的增殖能力较单独培养明显提高;在人成骨细胞存在的情况下，人脐静脉内皮细胞的增殖能力也显著提高;黄芪可以促进共育系内两种细胞的增殖，丹参则抑制共育系内两种细胞的增殖能力，淫羊藿促进共育系内两种细胞的增殖能力，其中以淫羊藿的作用能力最强。
(2)OPGmRNA，RANKLmRNA的表达结果，在人成骨细胞中，黄芪可以上调OPG、下调RANKL基因的表达;丹参下调OPG、上调RANKL基因的表达;淫羊藿可以上调OPG、下调RANKL基因的表达。共育系内OPG、RANKLmRNA表达未检测。
(3)OPG/RANKL蛋白的表达结果，对单独培养的人成骨细胞，黄芪抑制OPG、RANKL蛋白的表达，丹参抑制OPG、RANKL蛋白的表达，淫羊藿促进OPG蛋白的表达，抑制RANKL蛋白的表达;对单独培养在人脐静脉内皮细胞中，黄芪、丹参、淫羊藿均抑制VEGF蛋白的表达;在共育系内，OPG蛋白的表达高峰提前，而RANKL蛋白表达与单体培养一致;黄芪抑制OPG、RANKL蛋白的表达，丹参抑制OPG、RANKL蛋白的表达，淫羊藿促进OPG、RANKL蛋白的表达。
结论：体外共培养环境下，人成骨细胞与人脐静脉内皮细胞具有相互协同作用。三种中药对血管形成/骨形成耦联的调控特点不同:补气药黄芪和补肾药淫羊藿均表现出促进血管形成/骨形成的作用，活血药丹参以促血管形成为特点，抑制骨形成。