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本研究基于上述免疫学和分子生物学的研究结果以及IL-1ra临床应用需解决的问题,拟构建可在真核细胞表达IL1-ra的重组质粒,尝试IL-1ra基因原位转染对角膜碱烧伤和角膜移植排斥反应进行基因治疗,并初步分析其对免疫炎症因子网络的抑制机制,探索对角膜免疫炎症性疾病的新治疗模式。
本文构建了可在真核细胞内高效表达IL-1ra的重组质粒PEGFP-C2-hIL-1ra和PcDNA3.1-hIL-1ra,以便用于IL-1ra基因治疗研究;研究了角膜基质注射和前房注射阳离子聚合体(线性聚乙烯亚胺Poly-ethylenimine,PEI)/IL-1ra质粒复合物,转染角膜组织的有效性和安全性;探讨了阳离子聚合物包装IL-1ra重组质粒对角膜碱烧伤进行基因治疗的效果,分析外源性IL-1ra蛋白抑制碱烧伤炎症反应和新生血管的机制;研究了IL-1ra基因治疗和预防角膜移植排斥反应的效果,并探讨其免疫学抑制机制,结果表明,IL-1ra基因治疗可望在角膜移植免疫排斥的防治中发挥重要的作用。