【摘 要】
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目的:通过体外培养诱导慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞,检测其经过亚硒酸钠作用后谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的活性及细胞因子IL-12表达和刺激自身淋巴细胞
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目的:通过体外培养诱导慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞,检测其经过亚硒酸钠作用后谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的活性及细胞因子IL-12表达和刺激自身淋巴细胞增殖反应的能力,观察DC的体外抗病毒作用,探讨慢性肝炎患者树突状细胞功能的改变及机制,寻求改善树突状细胞功能的途径。方法:(1)建立用重组人GM-CSF、重组人IL-4、重组人IFN-α等细胞因子诱生,无血清培养基AIM-V培养慢性乙型肝炎患者、健康献血者外周血单个核细胞的方法。(2)收集慢性乙肝患者20例外周血,每份血分成2份,其树突状细胞在诱生过程中不加亚硒酸钠处理为乙肝组,加硒者为加硒组。健康献血者8例为对照组。(3)用流式细胞仪检测CD86、CD80;免疫组织化学(SP法)检测HLA-DR等表面分子的表达;瑞氏染色、透射及扫描电镜观察其形态;MTT法检测DC对同种异体淋巴细胞的增殖能力(MLR)及ELISA法检测细胞因子IL-12的分泌。(4)用比色法检测3组DC内GSH-Px、MDA的活性。(5)将3组的DC作用自身淋巴细胞后再与HePG2.2.15细胞共培养24h、48h、72h,ELISA法分别检测HBsAg、HBeAg的分泌。结果:(1)用无血清培养基培养和细胞因子诱生出的细胞经形态学、细胞表面分子和功能检测3方面鉴定可以得到数量较多的树突状细胞。
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