【摘 要】
：
数字PCR是一种用于核酸分子绝对定量和罕见突变检测的有力方法,采用平行的,分离的PCR反应来扩增和定量核酸分子。传统的数字PCR芯片存在依赖外部控制设备、工艺复杂、样品蒸发等问题,不利于提高检测过程的稳定性、经济性以及高效性。因此,兼具制备工艺简单与精准定量检测的数字PCR芯片成为未来微型核酸定量设备的发展趋势。本文提出一种基于微通道板的数字PCR检测芯片,主要研究内容如下:（1）芯片设计与检测流
论文部分内容阅读
数字PCR是一种用于核酸分子绝对定量和罕见突变检测的有力方法,采用平行的,分离的PCR反应来扩增和定量核酸分子。传统的数字PCR芯片存在依赖外部控制设备、工艺复杂、样品蒸发等问题,不利于提高检测过程的稳定性、经济性以及高效性。因此,兼具制备工艺简单与精准定量检测的数字PCR芯片成为未来微型核酸定量设备的发展趋势。本文提出一种基于微通道板的数字PCR检测芯片,主要研究内容如下:（1）芯片设计与检测流程,为了简化芯片制备工艺,采用微通道板作为PCR反应平台,传统微通道板是通过纤维拉伸工艺制作的玻璃通孔阵列,因其具有光电子倍增特性而广泛应用于影像增强和微光夜视。本文所制作的微通道板仅保留其阵列结构,微通道基底材料为玻璃,具有良好的荧光可视化特性与防蒸发性能,大大简化了传统数字PCR芯片需要集成纳米防水层的工艺复杂度。该芯片将微通道板切割并通过等离子键合技术单片集成于PDMS微流道中,利用PDMS材料气溶性完成自吸入进样,使用自固化硅油完成样品分隔与密封,该芯片单个微通道体积为0.1 n L,阵列密度为150000个/cm~2。（2）核酸分子定量检测,为了验证该芯片的绝对定量性能,使用该芯片对Lambda-DNA以及肺癌相关PLAU基因进行绝对定量检测,通过荧光显微镜采集微通道板的数字化分布结果并绘制线性拟合曲线,R~2分别为0.9998和0.9996,证明该芯片具有绝对定量能力。同时,将该芯片检测样品浓度与商用Nano Drop仪与QPCR仪检测同源样品浓度进行比较,检测结果具有高度一致性,证明该芯片绝对定量性能优异。使用该芯片对同源Lambda-DNA样品进行三次独立检测,检测结果标准偏差均小于10%,证明该芯片定量性能稳定,检测动态范围跨越5个数量级。（3）数字ELISA测试与荧光增强,为了验证该芯片是否能用于蛋白质定量,将该芯片结构改进后用于半乳糖苷酶的数字ELISA检测,建立200 fg/μL-40 fg/μL浓度范围内良好线性模型,R~2为0.987,检测极限为4 fg/μL。为了增强图像数字化结果,使用倾斜角沉积技术与阴影效应在微通道内壁生长金包裹银纳米棒来增强荧光信号,增大阳性与阴性微通道的信号差,减少假阳性或假阴性的误判。最后,该芯片不需要复杂的光刻或多层软光刻工艺,可以大规模低成本地制备,具备应用于临床诊疗产业化的潜力。
其他文献
随着我国经济的不断发展，英语已成为大学生需要掌握的一门语言。在大学英语课中实施课程思政建设，主要需要教师做到全面融入思政元素，实现英语课程与思政元素的相互融合。本文通过对大学英语课程的了解，深入研究大学英语课程中教师、教学内容、教学方法、教学模式等方面包含的思政元素，明确大学英语课程思政的重要性，提出大学英语教学过程中融入思政元素的有效措施，为培育具有优秀价值观和高能力的专业素质型人才提供有效帮助
以长江流域四川区域18个城市为研究对象，分析了近5年区域内长江干流（四川段）、支流岷沱江和嘉陵江流域典型城市建成区的水环境质量变化趋势及主要污染指标，估算流域内城镇生活源、工业源和城市面源化学需氧量（COD）、氨氮、总氮（TN）和总磷（TP）污染排放负荷，解析城市水生态环境问题及成因。结果表明：近5年长江流域四川区域城市水体水质逐年向好，TP、氨氮、TN和COD是区域内水体的主要污染指标；城镇生活
级联型电力电子变压器（Power Electronic Transformer,PET）前级拓扑——级联H桥整流器（Cascaded H-Bridge Rectifier,CHBR）存在电压失衡和直流侧二次电压纹波等问题,严重危害PET装置安全稳定运行,为此本文针对CHBR装置开展直流侧电压均衡和直流侧二次电压纹波抑制两方面的研究工作。为了解决单相CHBR直流侧电压失衡问题,建立CHBR直流电压失
采用向量型分类算法对运动想象脑电信号张量特征进行分类时，往往会破坏张量特征的结构信息和内在相关性。为此，提出一种基于张量降维和逻辑张量回归的运动想象脑电信号分类算法。在特征提取阶段，采用结合多线性主成分分析和高阶判别分析的张量降维算法提取运动想象脑电信号的张量特征；在特征分类阶段，采用L2范数正则化的逻辑张量回归算法对张量特征进行分类。实验结果表明，提出算法的平均分类准确率达到86.22%,相比于
＜正＞我们要多理解以工代赈项目的政策初心，给予以工代赈政策受益群体更多关心，增强对以工代赈项目执行效果的信心，让一些欠发达地区、易地搬迁地区、遭受自然灾害地区群众通过就业增加收入更暖心，体现在共同富裕的道路上一个也不落下的决心近日，国家发展改革委员会颁布新版《国家以工代赈管理办法》，其中，“能用人工尽量不用机械，能组织当地群众务工尽量不用专业施工队伍”的规定引起热议，出现“倒退说”“发钱论”等质疑
《杀死一只知更鸟》是世界上最有名的成长小说之一，也被誉为西方最著名的小说之一。它不仅包含小孩子的教育问题、黑人歧视问题，更包含着信仰与现实的斗争问题。小说发表于二战后，战争后的美国失去秩序，年轻人失去对生活的信仰。这本小说运用了多种圣经中的隐喻，可以说是一本圣经的改写，具有象征意义和启示性。
创意表达是文学类文本的本质特征。文学类文本的阅读应当关注它的创意表达，这是个性化审美体验和个体语言经验形成的关键渠道。不同体裁的文学类文本，创意表达的落点并不相同。认识并紧扣创意表达的落点，是开展文学类文本阅读教学的基本通道。同时，将创意表达作为实现单元内整体阅读与写作的融通点，也是建构文学阅读与创意表达任务群的基本要求。
随着地区力量对比的变化,东亚安全正在经历一次重要的转型期。东亚能否建立适合本地区的安全治理模式,确保地区安全秩序的稳定,成为一项重要课题。从不同的国际关系理论出发,学者得出了不同的甚至是自相矛盾的结论。东亚安全的区域治理,应当建立在东亚自身"区域性"的基础上,根据东亚安全的问题变化,采用"问题驱动"而非研究范式驱动的研究思路,从而实现有效的地区安全治理。此外,东盟地区论坛也可以在其中发挥重要作用。