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目的:本研究通过体内实验,利用组织及分子生物学技术,观察七叶胆苷ⅩⅦ(Gypenoside XVII,GP-17)对UV照射引起小鼠皮肤光老化的拮抗作用,及皮肤组织中内质网应激IRE1信号通路相关分子的影响,部分阐明内质网应激的作用途径,完善皮肤光老化的发生机制,探究七叶胆苷ⅩⅦ在防治光老化皮肤形成过程中的作用机制,以期对七叶胆苷ⅩⅦ防治皮肤光老化有更加全面充分的认识,为中医药在防治光老化皮肤的工作中提供新的理论依据。材料与方法:采用昆明小鼠60只,随机分为6组,每组10只,即空白对照组、模型对照组、阳性药物对照组、七叶胆苷高剂量组、七叶胆苷中剂量组及七叶胆苷低剂量组。空白对照组只剃毛不予其它处理,模型对照组灌服生理盐水,阳性药物对照组灌服维生素E,七叶胆苷高中低剂量组灌服不同浓度的七叶胆苷溶液为处理因素。除空白对照组外其余各组照射在UVA+UVB复合光源(40W紫外线灯管:UVB灯管5根,UVA灯管2根)下,制备小鼠皮肤光老化模型。将每组小鼠背部靠近颈部的皮肤,面积约2×2cm~2,用动物剃毛器将长毛及绒毛剔除,并隔3日剃毛一次。将鼠笼并列放在地面上,并将光源距离水平地面30cm处平行于鼠笼放置,使每个鼠笼充分接触到光源的照射。1-4周每天0.5h/d,5-8周1h/d,9-12周2h/d,共计十二周。第13周颈椎脱位法处死全部小鼠后,立即用眼科剪剪取下背部正中全层皮肤,一部分进行HE染色,进行形态学观察;另一部分采用双抗夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA试剂)进行皮肤组织中葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)、X-盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、CCAAT-增强子结合蛋白同源蛋白(C/EBP homologus protein,CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteine aspastic acid-specific protease 3,caspase-3)含量的测定。结果:1、肉眼观察结果与空白对照组比较,模型对照组小鼠背部皮肤,出现红斑、颜色加深、纹理增粗等表现。与模型对照组比较,七叶胆苷低剂量、七叶胆苷中剂量组、七叶胆苷高剂量组上述临床表现均有所改善,并随着剂量浓度的增加效果越明显。2、组织形态学观察结果与空白对照组比较,模型对照组小鼠皮肤出现表皮层厚度增加,真皮胶原纤维变性,排列紊乱,炎性细胞浸润等表现。与模型对照组比较,七叶胆苷中剂量组、七叶胆苷低剂量组表皮厚度仍有增加,较模型对照组稍有改善,真皮纤维卷曲断裂现象仍旧明显;七叶胆苷高剂量组小鼠较模型对照组相比,其可见的真皮纤维断裂以及卷曲现象有所减轻,表皮厚度接近正常值。3、ELISA检测结果3.1各组小鼠皮肤组织中GRP78含量与空白对照组比较,模型对照组中的GRP78含量显著上调,差异有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,七叶胆苷高、中、低剂量组的GRP78含量下调差异有统计学意义(P<0.01);与阳性药物对照组比较,七叶胆苷低剂量组GRP78含量上调,差异具有统计学意义(P<0.01),而七叶胆苷高剂量组和七叶胆苷中剂量组不具有统计学意义(P>0.05)。3.2各组小鼠皮肤组织中XBP1含量与空白对照组比较,模型对照组中XBP1含量显著上调,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,七叶胆苷高、中、低剂量组的XBP1含量下调,差异具有统计学意义(P<0.01);与阳性药物对照组比较,七叶胆苷中、低剂量组XBP1含量上调,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05),而七叶胆苷高剂量组不具有统计学意义(P>0.05)。3.3各组小鼠皮肤组织中CHOP含量与空白对照组比较,模型对照组中CHOP含量显著上调,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,七叶胆苷高、中、低剂量组的CHOP含量下调,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与阳性药物对照组比较,七叶胆苷低剂量组CHOP含量上调,差异具有统计学意义(P<0.01),而七叶胆苷高剂量组和七叶胆苷中剂量组不具有统计学意义(P>0.05)。3.4各组小鼠皮肤组织中caspase-3含量与空白对照组比较,模型对照组中caspase-3含量显著上调,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,七叶胆苷高、中剂量组的caspase-3含量下调,差异具有统计学意义(P<0.01),七叶胆苷低剂量组不具有统计学意义(P>0.05);与阳性药物对照组比较,七叶胆苷中剂量组caspase-3含量上调,差异具有统计学意义(P<0.05),而七叶胆苷高剂量组不具有统计学意义(P>0.05)。3.2 XBP1含量与空白对照组比较,模型对照组中XBP1含量显著上调,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型对照组比较,七叶胆苷高、中、低剂量组的XBP1含量下调,差异具有统计学意义(P<0.01);与阳性药物对照组比较,七叶胆苷中、低剂量组XBP1含量上调,差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05),而七叶胆苷高剂量组不具有统计学意义(P>0.05)。结论:1、七叶胆苷ⅩⅦ对UV照射引起的小鼠皮肤光老化具有保护作用,且不同剂量七叶胆苷疗效有一定差异,以高剂量应用疗效最佳。2、模型对照组小鼠皮肤组织中GRP78、XBP1、CHOP、caspase-3蛋白表达比空白对照组显著升高,提示内质网应激IRE1ɑ信号转导通路及细胞凋亡,均与皮肤光老化的发病机制有关。3、七叶胆苷高、中、低剂量组和阳性药物对照组GRP78、XBP1、CHOP、caspase-3表达均显著降低,表明七叶胆苷抑制了UV长期照射引起的IRE1ɑ信号转导通路的激活状态,从而阻断caspase-3的激活,抑制细胞凋亡,继而一定程度上拮抗皮肤光老化的进程。