【摘 要】
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芍药(Paeonia lactiflora)是一种中国传统花卉,符合我国人民传统审美,同时在我国又作为一种有据可考的爱情象征,可以预估其在我国未来花卉市场和园林绿化、城市美化建设中将有着难以估量的潜力。在花卉生产中,逆境胁迫是影响花卉产量质量的很大一部分因素,提高花卉抗逆性无论是对于花卉改良育种和花卉生产都有着十分重要的意义。本研究以芍药品种‘Karl Rosenfield’为实验材料,以课题组前
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芍药(Paeonia lactiflora)是一种中国传统花卉,符合我国人民传统审美,同时在我国又作为一种有据可考的爱情象征,可以预估其在我国未来花卉市场和园林绿化、城市美化建设中将有着难以估量的潜力。在花卉生产中,逆境胁迫是影响花卉产量质量的很大一部分因素,提高花卉抗逆性无论是对于花卉改良育种和花卉生产都有着十分重要的意义。本研究以芍药品种‘Karl Rosenfield’为实验材料,以课题组前期转录组数据为依据,筛选出两个响应干旱胁迫的差异表达基因家族展开分析,分别选择其中一个基因进行克隆及生物信息学分析;采用双酶切法和无缝克隆法分别构建植物表达载体。选取两个芍药品种‘Karl Rosenfield’和‘粉玉奴’进行盐胁迫试验,测定其生理指标变化及基因表达特性,与干旱胁迫下基因表达特性变化进行对比,以探索目的基因在渗透胁迫下的应答调控情况,进一步对基因功能进行分析验证。本文的主要研究结果如下:1.对两个响应干旱胁迫差异表达的基因家族进行了分析与表达验证,分别筛选出1个表达量高、开放阅读框完整且受干旱胁迫调控而上调表达的代表性基因。2.克隆出了两个差异表达基因Pl GRAS和Plad3H1的编码区序列,测序结果与转录组数据一致,通过序列比对和分析,推测Pl GRAS基因可能为GRAS家族SHR亚族成员(SCL32),Plad3H1可能为醛脱氢酶家族3成员H1。3.采用双酶切法和无缝克隆法分别构建了带有GFP荧光蛋白的植物表达载体p BI-121-EGFP(2)-Pl GRAS和p CAMBIA1300-GFP-Plad3H1。4.选取两个不同的芍药品种进行盐胁迫试验,测定盐胁迫下芍药生理指标变化及两个基因的表达特性,与干旱胁迫下的表达特性进行对比,结果表明,Pl GRAS和Plad3H1基因在两个芍药品种中表达的组织特异性较为一致,二者随干旱胁迫程度加剧而上调表达,在盐胁迫下的响应情况与干旱胁迫下也具有一定的相似性,在两个芍药品种中的响应情况也较为一致。
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