论文部分内容阅读
目的:脓毒症是由于体内外的感染因素入侵机体而引发的全身炎症反应综合征,涉及到固有免疫和适应性免疫。巨噬细胞是一种几乎分布于机体所有组织的吞噬细胞,不仅在固有免疫中发挥重要作用,还连接了固有免疫和适应性免疫。因此在脓毒症过程中巨噬细胞的分化及其功能显得尤为重要。高压氧治疗作为一种针对脓毒症的有效治疗方式已被证实。高压氧治疗脓毒症的过程中,必定对巨噬细胞的炎症功能产生影响,但具体影响还不清楚。本研究旨在通过观察经高压氧治疗后脓毒症小鼠腹腔巨噬细胞炎症功能的变化。方法:1、实验分组及动物模型的制备:选取100只C57BL/6小鼠,随机平均分为A(空白组)(注射生理盐水+呼吸空气)、B(脓毒症组)(注射酵母多糖+呼吸空气)、C(高压氧组)(注射生理盐水+高压氧)、D(脓毒症+高压氧组)(注射酵母多糖+高压氧);采用酵母多糖腹腔注射法复制腹腔感染脓毒症的动物模型,B组和D组小鼠给予腹腔注射酵母多糖,A组和C组注射等体积的生理盐水,C组和D组的小鼠分别于实验开始后第4小时和第11小时给予2个绝对大气压的100%纯氧供氧2h;2、比较四组小鼠72小时的存活情况;实验开始后第18小时,取小鼠外周血,采用ELISA法检测小鼠外周血炎性因子IL-12、IL-10含量的变化;实验开始后第18h,采用免疫磁珠分选法分离巨噬细胞,经流式细胞仪检测M1型巨噬细胞的数量;RT-PCR检测腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶mRNA相对表达水平;3、统计学方法:用SPSS19.0统计软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差((3?±)表示,组间比较采用单因素方差分析(方差齐采用LSD检验、方差不齐采用Dunnett’s T3检验),小鼠存活情况采用?~2Fisher检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果:与B(脓毒症组)比较,D(脓毒症+高压氧组)小鼠72小时存活数明显提高(P<0.05);与B(脓毒症组)比较,D(脓毒症+高压氧组)M1型巨噬细胞的比例明显下降(P<0.05),iNOS mRNA相对表达量显著降低(P<0.05);与B(脓毒症组)比较,D(脓毒症+高压氧组)外周血IL-12水平明显降低(P<0.05),IL-10水平明显升高(P<0.05)。结论:高压氧治疗能提高脓毒症组小鼠72小时存活数,降低外周血IL-12的水平、升高IL-10的水平;通过抑制M1型巨噬细胞及诱导型一氧化氮合酶表达,减弱了过度的炎症反应从而对小鼠起到保护作用。