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柴胡是大宗常用中药材,始载于《神农本草经》,列为上品。《中国药典》2010年版收载为伞形科植物柴胡Bupleunum chinense DC.和狭叶柴胡Bupleunum scorzonerifolium Willd.的干燥根。是多个著名方剂,如小柴胡汤、逍遥散、补中益气汤等的要药,商品年收购量300万～500万kg,市场需求量逐年上升。目前,全国有二十多种柴胡属植物在不同地区作为地区习用中药入药,已逐步形成区域性的药用资源。西南地区有柴胡属多种植物入拓。《四川省中药材标准》2010年版收载“竹叶柴胡”,为竹叶柴胡Bupleurum marginatum Wall.ex DC.、马尾柴胡Bupleurum microcephalum Diels.或马尔康柴胡Bupleurum malconense Shan et Y. Li的干燥全草,所载功效与用量均与《中国药典》中的柴胡基本相同。四川产“竹叶柴胡”与《中国药典》柴胡品种不同,药用部位亦不相同,其药材质量参差不齐,药用的安全性、有效性、科学性亟待验证。课题组前期调查结果认为马尔康柴胡B. malconense是四川地区习用品“竹叶柴胡”野生品的主流品种,主要分布于四川西北部,资源量较大,质量较优,故本文选择马尔康柴胡B. Malconense对其不同药用部位进行药用价值评价研究,以期为科学和全面评价川产“竹叶柴胡”的药用价值奠定基础,本论文取得了如下成果并有所创新：1.马尔康柴胡生药学研究。①对柴胡属植物古今药用品种和药用部位情况进行了考证：我国自古主要用柴胡属多种植物的根作药用,亦有记载柴胡地上部分入药,但功效与根完全不同。现今柴胡属二十多种植物在我国不同地区作为地区习用品入药,北方地区主要用根,西南地区用全草,华东、华南地区将根与茎叶分开使用。②对马尔康柴胡原植物进行了基原鉴定：为伞形科植物Bupleurum malconense Shan et Y. Li。③对马尔康柴胡地上部分与根进行了形态组织学研究：找出了它们在性状和显微鉴定方面的主要鉴别特征。④对不同部位分别进行了薄层色谱鉴别,并进行了水分、灰分和浸出物测定。⑤进行了柴胡皂苷a、c、d的含量测定：柴胡皂苷是柴胡的主要活性成分,从含量测定结果可知,马尔康柴胡地下部分皂苷含量基本符合《中国药典》“柴胡”项下的要求,地上部分皂苷含量极微,仅为地下部分含量的1/10左右。2.马尔康柴胡药效学研究。首次对马尔康柴胡地上、地下部分进行了药效学比较研究与急性毒性试验。①解热作用：马尔康柴胡地上、地下部分均可显著降低干酵母导致的大鼠体温升高,具有一定解热作用,作用机制可能与抑制炎症反应有关,解热作用强度地下部分小于地上部分。②保肝作用：马尔康柴胡地上、地下部分均能显著降低GOT、GTP水平,降低MDA水平,升高GSH水平,使肝细胞坏死及水肿变性程度减轻,减轻CCl4引起的小鼠肝损伤,具有一定的保肝作用,其保肝机制与抗脂质过氧化损伤有关。保肝作用强度地下部分大于地上部分。③急性毒性：马尔康柴胡地上、地下部分最大剂量给药时,可使肝体比增大,GOT和GPT水平显著升高。小鼠大剂量灌胃马尔康柴胡水提取液,有一定程度的肝脏急性毒性.停药后1周左右可恢复正常。3.首次应用AMDIS和保留指数法分析了马尔康柴胡地上部分、根与柴胡(北柴胡)挥发油的成分。挥发油是柴胡解热作用的传统药效部位,首次采用AMDIS及保留指数法对化合物进行准确定性,从马尔康柴胡地下、地上部分及北柴胡的中分别鉴定出47、45、50种挥发性成分,其成分种类及相对含量因品种和药用部位不同而存在差异。马尔康柴胡地上、地下部分均有较高含量的抗炎镇痛活性成分氧化石竹烯,且挥发油主要成分种类与北柴胡有较好一致性,认为马尔康柴胡地上与地下部分用于感冒发热等症,有一定科学依据。4.首次对马尔康柴胡地上部分的化学成分进行了分离与结构鉴定。对地上部分乙酸乙酯萃取部位进行化学成分分离纯化,共分离得到22个成分,采用谱学技术和理化性质测定鉴定化合物12个。12个化合物均为首次从马尔康柴胡Bupleurum malconense Shan et Y. Li植物中分得,3个化合物为首次从柴胡属(Bupleurum L.)植物中分离得,1个化合物为新骨架化合物。5.首次建立了马尔康柴胡地上部分黄酮类成分的HPLC特征图谱及总黄酮醇苷的含量测定。确定了9个共有特征峰,选择峰4芦丁为参照峰(S),标定6个色谱峰,并规定特征峰的相对保留时间及相似度。首次建立了HPLC测定马尔康柴胡黄酮苷水解后三种苷元含量的方法,计算总黄酮醇苷的含量,马尔康柴胡地上部分含量在4%左右,具有较好的药用价值。根总黄酮醇苷的含量仅为地上部分的约1/40左右。6.首次分别建立了马尔康柴胡地上部分和根的质量标准(草案)。为马尔康柴胡进而为川产“竹叶柴胡”的质量控制提供了参考依据。综上所述,本论文从生药学、药理作用、化学成分、质量标准等方面对马尔康柴胡地上、地下部分分别进行了较为系统的研究。结果显示马尔康柴胡地上部分长于解热,地下部分长于保肝作用,且不同部位药效物质成分柴胡皂苷、挥发油及黄酮类成分有较大差异且含量较为悬殊,认为马尔康柴胡地上、地下部分应分别入药。并对地上部分药效物质基础进行了成分分析研究,分离解析出12个化合物,其中1个为新骨架化合物；在前述基础上,建立了地上部分黄酮类化合物特征图谱,及测定地上部分总黄酮醇苷含量的方法,分别制定了地上部分和根的质量标准(草案)。上述工作为马尔康柴胡地上部分和根分别药用提供了一定科学依据,为其资源的合理利用奠定了基础。