论文部分内容阅读
目的:明确LINC01123在宫颈癌中的表达情况,探讨LINC01123对宫颈癌增殖、迁移、顺铂敏感性的影响。方法:(1)通过GEPIA数据库分析LINC01123在宫颈癌中的表达情况;收集我院2021年6月至2022年2月宫颈癌组织及癌旁组织标本,lnc RNAs芯片分析和q RT-PCR验证LINC01123在宫颈癌组织中的表达情况(2)汇总患者基本信息与临床资料,并分析其表达水平与临床特征的关系。(3)构建ROC曲线,评估LINC01123对宫颈癌的诊断价值。(4)通过q RT-PCR明确LINC01123在人正常子宫颈上皮细胞Hcer Epic、宫颈鳞癌细胞系Si Ha和C33A中的表达情况。(5)通过慢病毒敲低Si Ha细胞中LINC01123的水平,研究LINC01123对Si Ha细胞增殖、迁移、顺铂敏感性的影响。(6)腺病毒过表达LINC01123,观察过表达对LINC01123对Si Ha细胞增殖的影响。(7)Western blot和q RT-PCR检测敲低LINC01123对Si Ha细胞中SLC7A11、GPX4表达的情况。(8)通过q RT-PCR检测LINC01123对Si Ha细胞中Bcl-2、ZEB1的转录水平的影响。结果:(1)GEPIA预测LINC01123在宫颈癌中高表达,lnc RNAs芯片测序及q RT-PCR结果表明,与对应癌旁组织相比,LINC01123在宫颈癌组织中高表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)收集了27例患者的癌组织与癌旁组织标本,24例患者为鳞癌,其中小于45岁的占比22.2%,患者的FIGO分期为ⅠA1~ⅡA1期。根据LINC01123的表达水平,将患者分为高表达组与低表达组,与临床资料结合进行两组比较,结果显示,两组患者在年龄、分期、浸润深度等临床变量中的差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)LINC01123诊断宫颈癌的灵敏度为81.2%,ROC曲线的AUC为0.732(P<0.01),与CEA、SCC相比,LINC01123更有诊断价值。(4)LINC01123在宫颈鳞癌细胞系Si Ha、C33A中的表达均明显高于正常子宫颈上皮细胞Hcer Epic(P<0.01),其中Si Ha的表达最高。(5)敲低Si Ha细胞中的LINC01123,CCK8、细胞划痕实验结果显示,sh-LINC01123组细胞增殖受到明显抑制(P<0.05);CCK8测得顺铂作用于Si Ha细胞的IC20约为5μg/m L,在该浓度下sh-LINC01123细胞的抑制率为31.57±3.58%,Si Ha为21.39±2.13%,差异具有统计学意义(P<0.05)。(6)过表达Si Ha细胞中的LINC01123,与对照组相比,过表达LINC01123明显促进了细胞增殖(P<0.05)。(7)q RT-PCR及Western blot结果显示,敲低LINC01123抑制了SLC7A11、GPX4的转录与表达,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。(8)敲低LINC01123抑制了抗凋亡蛋白Bcl-2、EMT相关蛋白ZEB1的转录,过表达则呈现了相反的结果,其转录水平的差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:(1)LINC01123在宫颈癌组织、细胞中高表达,有望成为诊断宫颈癌的新型生物标志物。(2)LINC01123促进宫颈鳞癌细胞的增殖、迁移与耐药。(3)LINC01123可能调控SLC7A11、GPX4的表达,调控Bcl-2、ZEB1的转录从而发挥着促癌作用,这可能为宫颈癌的治疗提供新的靶点。