论文部分内容阅读
目的:复制糖尿病大鼠模型，观察中药复方和依那普利对糖尿病大鼠肾小管PKCa和ERK1/2表达的影响，探讨自拟的中药复方和依那普利对糖尿病大鼠肾脏保护作用的作用机制。 方法:雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组（N组），糖尿病组（D组），糖尿病中药复方1号治疗组（Y1组），糖尿病中药复方2号治疗组（Y2组），糖尿病依那普利治疗组（E组）。采用链尿佐菌素尾静脉注射(55mg/kg)的方法复制糖尿病动物模型。生化方法测血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、胆固醇，并计算肾脏指数。HE染色光镜检查肾组织形态学变化。免疫组织化学法检测大鼠肾脏PKC、TGF-β1、FN、ERK1/2蛋白表达情况，RT-PCR法检测大鼠肾皮质ERK2mRNA水平。 结果:①D组大鼠肾脏指数、血糖、24h尿蛋白、血肌酐、甘油三酯、胆固醇较N组明显升高（P＜0.01）;Y1组、Y2组与D组大鼠相比，24h尿蛋白量、胆固醇、甘油三酯显著降低（P＜0.01或P＜0.05）;Y1组、E组大鼠血肌酐较D组明显降低(P＜0.05);而Y2组大鼠血肌酐较D组有所降低，但不具有统计学意义。②D组大鼠出现明显的肾脏形态学改变，系膜区基质沉积增多，肾小管上皮细胞肿胀，空泡变性及基底膜增厚，Y1组、Y2组和E组明显改善。③免疫组化结果显示:N组大鼠肾小管上皮细胞PKCa蛋白少量表达，D组较N组明显增加(P＜0.01)，Y1组、Y2组显著低于D组(P＜0.01)，E组也明显低于D组（P＜0.01），各治疗组之间差异无显著性（P＞0.05）。N组大鼠肾小管上皮细胞ERK1/2蛋白具有基础水平的表达，D组较N组明显增加（P＜0.01），Y1组显著低于D组（P＜0.01），E组、Y2组也明显低于D组（P＜0.05），各治疗组之间差异无显著性（P＞0.05）。N组大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1蛋白几乎无表达，D组表达明显高于N组（P＜0.01），Y1组、Y2组较D组明显降低（P＜0.05），E组也明显低于D组(P＜0.05)，各治疗组之间差异无显著性（P＞0.05）。N组大鼠肾小管基底膜FN蛋白表达较少，D组表达明显高于N组（P＜0.01），Y1组、Y2组较D组明显降低(P＜0.01)，E组也明显低于D组(P＜0.01)，各治疗组之间差异无显著性（P＞0.05）。④RT-PCR结果显示，ERK2 mRNA在N组有基础水平的表达，在D组显著增加（P＜0.01），Y1组、Y2组显著低于D组（P＜0.01），E组也显著低于D组（P＜0.01），各治疗组之间差异无显著性（P＞0.05）。 结论:1、依那普利可能通过抑制PKCa、ERK1/2表达而减少TGF-β1的生成，使肾组织FN等ECM沉积减少，从而延缓或阻断糖尿病肾脏肥大和纤维化，改善肾功能。2、中药复方1号、2号对DN的防治机制可能是通过抑制PKCa-ERK1/2信号通路而下调TGF-β1的过度表达，减轻肾脏肥大、减少ECM积聚，从而减轻肾脏的病理变化。3、中药复方1号、2号可显著降低糖尿病大鼠24h尿蛋白、甘油三酯、胆固醇的水平，明显改善糖尿病大鼠的肾功能，发挥其保护肾脏的作用，从而阻止或延缓DN的进展。