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背景及目的: 背景：白藜芦醇(resveratrol，RSV)化学名为反式-3,4’,5-三羟基-1,2-二苯乙烯(C14H12O3)，属于在多种植物中都发现了的多酚类，白藜芦醇天然含量最丰富的是首乌，一种用作中药的植物根部。白藜芦醇也大量存在于花生、虎杖、葡萄和红酒。文献中描述白藜芦醇的多种功效涉及到心脏保护，抗癌，抗炎和抗氧化功能。同时有文献报道白藜芦醇可以作为热量限制器发挥可能的抗衰老和抗糖尿病功效。Jang等人研究发现白藜芦醇可以从启动、促进和进展各个阶段抑制肿瘤。他们发现在在个体实验中近白藜芦醇处理后每只小鼠高达98％的肿瘤抑制率。白藜芦醇可通过各种互补的方式抑制肿瘤，它可以抑制各种环氧加酶的活性，这可以降低癌症的风险。另外一个白藜芦醇阻止肿瘤形成的机制是引起细胞周期阻止和凋亡。另外，体内实验明显表明这种小分子治疗癌症的希望，但是关于红酒饮用与癌症之间的关系的研究仍处于研究阶段。目前已有文献报道白藜芦醇能够诱导人早幼粒白血病HL-60细胞的凋亡，能够将细胞周期阻滞在G1期，提高BAX/Bcl-2的比值，但其机制仍不清楚。本实验以HL-60细胞为材料，从细胞代谢角度去研究白藜芦醇引起HL60细胞死亡的分子机制。 目的：研究RSV诱导HL-60细胞死亡过程中，糖代谢的变化及Ca2+、活性氧组份ROS在其中的作用和机制。 材料和方法: 用含10%超级新生牛血清的RPMI1640培养基体外培养HL60细胞，用25μM,50μM,100μM的RSV分别处理处于对数期的HL60细胞24 h、48h，倒置相差显微镜观察HL60细胞的形态学变化；MTT方法检测细胞的存活率；全波长荧光酶标仪检测不同浓度RSV、不同时间作用后相关的荧光值变化【钙离子浓度、过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子(O2-)、线粒体膜电位(MMP)变化】；Western blot检测相关通路蛋白的表达变化以及糖代谢相关蛋白的表达变化；G6PD酶活性试剂盒检测G6PD酶活性的变化；PCR以及定量实时荧光PCR检测 G6PD mRNA的变化。 结果: 1. MTT法检测，不同剂量的RSV对HL60细胞有不同程度的杀伤作用，这种作用呈剂量依赖性关系。 2.全波长荧光酶标仪的结果显示25μM,50μM,100μM的RSV处理HL-60细胞24 h后，O2-的量逐渐增加，而MMP与H2O2的量则迅速下降，作用48h后，趋势更为明显；加入钙离子螯合剂EGTA后，O2-的增加趋势下降，MMP与H2O2的上升趋势上升。 3.全波长荧光酶标仪的结果显示25μM,50μM,100μM的RSV处理HL-60细胞24 h后，钙离子含量逐渐增加，作用48h后，趋势更为明显。 4. Western Blotting检测相关通路的蛋白表达，随着白藜芦醇作用浓度增加，P-AMPK, P-Akt表达量下降，P-Erk表达量上升；随着作用时间延长而增长，P-AMPK, P-Akt表达量下降，P-Erk表达量下降。 5. Western Blotting检测糖酵解通路的蛋白表达，随着白藜芦醇作用浓度增加和作用时间延长而增长，蛋白表达量下降。 6. Western Blotting以及PCR技术分析显示G6PD表达量上升。 7. G6PD酶活性检测显示G6PD酶活性上升。 结论: 1．RSV能在一定浓度范围内在体外抑制HL-60细胞生长和增值，并且这种作用呈时间和剂量依赖关系。 2．钙离子和ROS在RSV引起HL60细胞凋亡过程中起信号分子的作用。 3．RSV能抑制HL60细胞糖酵解过程，但促进了磷酸戊糖途径。