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目的探讨17-βE2联合顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910体外生长、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法1.采用MTT法检测雌激素单用及合用顺铂对细胞增殖的影响。2.流式细胞仪分析不同浓度雌激素及联合顺铂对细胞周期和凋亡的影响。3.光镜、激光共聚焦显微镜观察雌激素及雌激素联合顺铂对细胞形态的影响。结果1.人卵巢癌细胞HO-8910形态学变化(1)倒置显微镜观察:对照组和雌激素组卵巢癌细胞生长状态良好,细胞伸展,呈铺路石状,随时间推移,细胞渐增多,细胞接触紧密。雌激素联合顺铂组卵巢癌细胞24h时见到细胞数目较少,但形态尚可,随时间推移,细胞浆内出现空泡,培养至72h时,细胞明显皱缩,体积变小,细胞间隙增大,培养液内可见少量细胞悬浮,部分细胞可见碎裂的细胞核,而胞浆仍完整。(2)激光共聚焦显微镜观察:对照组可见极少量凋亡细胞,顺铂组,雌激素组与对照组无明显差异。雌激素与顺铂联用组出现大量典型的凋亡细胞,细胞膜染色明显增强,荧光更为明亮,强度深浅不一。2.顺铂、17-βE2及两药联合对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖、凋亡的影响(1)17-βE2对卵巢癌细胞株HO-8910增殖的抑制作用:17-βE2作用24h后HO-8910细胞生长轻度增殖,但无显著性差异(P>0.05);48h后浓度为10×10-9～50×10-9mol/L对细胞增殖有促进作用,增殖促进率分别为22.8%和26.5%,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);72h后17-βE2作用较稳定,各处理组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。(2)17-βE2联合顺铂对卵巢癌细胞HO-8910增殖的抑制作用:17-βE2联合顺铂作用24 h后HO-8910细胞生长轻度抑制, 50×10-9mol/L浓度对细胞增殖有明显的抑制作用,有显著性差异(P<0.05);48 h后5×10-9mol/L-50×10-9mol/L浓度对细胞增殖均有抑制作用, ,且随着浓度的增加,增殖抑制率升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)和极显著性差异(P<0.01);72h后作用较稳定,各处理组与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。(3)17-βE2联合顺铂对卵巢癌细胞HO-8910增殖的增效作用:顺铂联用1×10-917-βE2表现为相加作用(0.85<q<1.15),顺铂联用5×10-9,10×10-9,50×10-9 17-βE2表现为协同作用(q>1.15)。3.顺铂、17-βE2及两药联合对人卵巢癌细胞株HO-8910细胞周期及凋亡率的影响:(1)经流式细胞仪检测,人卵巢癌细胞HO-8910细胞周期分布发生改变,与对照组比较,雌激素组S期细胞比例上升,凋亡率下降;顺铂组G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,凋亡率上升。雌激素联合顺铂组S期细胞比例进一步下降,凋亡率明显上升,与对照组和顺铂组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Annexin-V/PI染色法检测细胞凋亡,结果显示:①不同浓度的17-βE2作用下卵巢癌细胞HO-8910的细胞凋亡率分别为6.3%,6.0%,5.6%和5.1%与对照组(6.1%)相比较,差异无显著性,P>0.05。提示任何浓度的17-βE2均不能诱导卵巢癌细胞HO-8910产生凋亡。②顺铂作用下卵巢癌细胞HO-8910的细胞凋亡率为15.6%,与对照组(6.93%)相比较,差异有显著性,P<0.05。③不同浓度17-βE2联合顺铂作用下,卵巢癌细胞HO-8910的细胞凋亡率分别为16.8%,29.7%,31.2%,44.0%,与对照组(6.93%)相比较,差异有显著性,P<0.01。结论1.17-βE2不能诱导人卵巢癌细胞HO-8910发生凋亡,低浓度对卵巢癌细胞无作用,高浓度对细胞有明显的促进生长作用,提示在卵巢癌患者,给于低剂量激素替代治疗,不会增加卵巢癌的复发。2. 17-βE2联合顺铂可改变细胞周期的分布,使G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,协同抑制卵巢癌细胞HO-8910的增殖、促进其凋亡。提示雌激素与顺铂联用可提高顺铂的敏感性,增强化疗作用。3.卵巢癌术后病人给予低剂量雌激素可改善生命质量。