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目的:根据最新的年度统计结果,胃癌在癌症引起的死亡中位居第三位。由于胃癌发生时其临床症状不明显,导致大多数患者一经诊断便已是中晚期。晚期胃癌常见腹膜转移,然而腹膜转移的发生也是导致胃癌手术失败的主要原因,从而加重了胃癌晚期患者不良的预后。近些年因为腹膜微环境概念的逐渐深入,让我们对胃癌腹膜转移相关过程与机制有了更多新的认识。腹膜的组织结构很简单;由单层间皮细胞(MCs)排列,少量成纤维细胞,肥大细胞,巨噬细胞和血管结缔组织组成的紧密区域,腹膜间皮细胞细胞是覆盖于腹膜表面的主要细胞,由于其结构及生物活性,健康的腹膜间皮细胞也是阻碍肿瘤腹膜转移发生的第一道屏障。然而由于肿瘤的发生,导致腹膜环境随着发生相应改变。根据“种子土壤学说”理论推理,由于腹膜微环境的改变,性质发生改变的腹膜间皮细胞可由屏障变成更适合肿瘤生长的土壤。腹膜间皮细胞衰老则是其中的一种改变。衰老本身是一种正常的生命过程,然而衰老的不正常发生常常与肿瘤的发生密切相关。本研究首先模拟腹膜环境通过胃癌上清对腹膜间皮细胞进行直接诱导,从衰老的各个表现解释腹膜微环境诱导腹膜间皮细胞发生衰老的表现。此外还比较了腹膜间皮细胞衰老发生前后胃癌细胞粘附、迁移、侵袭能力的变化,进而进一步明确腹膜间皮细胞衰老在胃癌腹膜转移中的重要地位。方法:1.从人正常腹膜组织中提取腹膜间皮细胞,并利用来源于胃癌细胞的条件培养基对间皮细胞进行诱导,围绕衰老发生的各个过程去测量相关指标的表达,譬如衰老相关β半乳糖苷酶表达情况,用western blotting检测了CX43蛋白表达情况,并且用免疫荧光测量了γ-H2A.X表达情况,RT-PCR测量了P16表达情况。2.为探索腹膜间皮细胞衰老后促进胃癌腹膜转移发生的具体作用过程。体外实验用年轻腹膜间皮细胞和衰老腹膜间皮细胞分别对胃癌细胞诱导,从而通过对比两者黏附、迁移、侵袭能力的差异来明确衰老腹膜间皮细胞促进胃癌细胞腹膜转移的具体过程。结果:1.胃癌上清诱导腹膜间皮细胞后出现了衰老相关β半乳糖酶表达增加,缝隙蛋白43表达减少,DNA损伤相关蛋白γ-H2A.X表达增加,衰老相关基因P16表达增加。2.相较于年轻腹膜间皮细胞,衰老腹膜间皮细胞明显促进了胃癌细胞的粘附、迁移、侵袭能力。结论:胃癌细胞可通过分泌一系列生物活性物质促进腹膜间皮细胞发生衰老,其衰老表现有,衰老相关β半乳糖苷酶产生增多,缝隙连接蛋白减少,衰老相关DNA的活化损伤反应增加,以及与衰老相关基因表达增加。同时衰老的腹膜间皮细胞可促进胃癌细胞粘附、迁移、侵袭。