【摘 要】
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植物中对编程性细胞死亡(PCD)的了解甚少,对植物PCD的研究可能是进一步了解植物发育及代谢调控机理的突破口.我们用带有负选标记的Ac/Ds系统,对拟南芥进行了诱导突变,得到了
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植物中对编程性细胞死亡(PCD)的了解甚少,对植物PCD的研究可能是进一步了解植物发育及代谢调控机理的突破口.我们用带有负选标记的Ac/Ds系统,对拟南芥进行了诱导突变,得到了一株对温度敏感的单基因突变突变体,21℃下表型与野生型相同,在28℃以上温度会发生编程性细胞死亡,出现枯斑,温度越高枯斑越重,强光可以加速表型的出现,因其被环境诱导而出斑,所以命名为eil(environmentalinduced lesion). 遗传分析结果表明,eil突变为隐性单基因核突变.根据目前掌握的文献资料推测,eil很可能是一类新的拟南芥突变体.突变体与野生型对照在19℃光强50μEm<-2>S<-1>条件下的生长箱中生长10天(非枯斑诱导的生长条件),然后移到29℃同样光照条件下生长(枯斑诱导条件),取不同处理时间的全苗进行抗氧化酶类分析,结果表明SOD酶活在高温处理的第3天,突变体就有了明显的升高.而POD酶活在第3天并没有表现出变化,第4天才有所提高.与此同时APX和CAT酶活性在第3天也都有所提高.可见,POD酶与其它清除自由基的酶活性是不匹配的.由于各种清除自由基酶类的不配套性,可能造成eil叶片中过多的自由基积累.对于7T9E23基因进行了过量表达研究.基因构建到pMON530载体中,转入农杆菌ASE转化野生型Ler,卡那抗性筛选得到12棵绿苗,经PCR鉴定有7棵是转基因的转化子.这些转化子的共同特征是在苗期,转化子表现的是叶圆,叶柄短,叶相对野生型要小,开花以后,转化子植株较野生型要矮,花密,节间短,果荚小,果柄短.如果开花期转入较高温度下生长(光强240μ molphotonsm<-2>S<-1> ,温度25℃)会表现不育.解剖花发现不育是由于雄蕊短而引起的.这可能是在高温下,7T9E23基因表达更强烈,其特征是使节间缩短,表现在雄蕊上也是变短,造成不育.由此推测该基因的功能可能与叶、节间发育有关.
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