Cdk5激酶活性在视网膜色素变性疾病中的作用研究

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目的探讨Cdk5/P25激酶活性在视网膜色素变性发病中的作用。方法SPF级RCS大鼠18只(实验组)及RCS-rdy+大鼠18只(对照组),依据出生日龄不同,以随机数字表法,随机分为分为17天、25天、35天三组,每组为6只。各组大鼠分别在相应时间点处死后摘取眼球并制备视网膜组织。利用WesternBlot方法检测出生后17d、25d、35d的RCS(RoyalCollegeofSurgeons)大鼠和正常对照RCS-rdy+大鼠的视网膜组织中Cdk5、P35、P25蛋白表达水平和tau蛋白磷酸化水平;并利用分光光度仪(光谱法)测定各日龄两组大鼠视网膜组织吸光峰值的变化(340nm),来定量分析各组Cdk5/P25激酶活性。实验数据根据计量资料以均数士标准差(x±s)表示,使用SPSS17.0软件进行统计分析。结果1.P35蛋白在17日龄的RCS大鼠和RCS-rdy+大鼠的视网膜组织中表达水平差异无统计学意义(t=0.52,P>0.05),25日龄和35日龄RCS大鼠视网膜组织中P35蛋白表达水平分别为2.20±0.48、1.23±0.14,明显高于RCS-rdy+大鼠的1.43±0.13和0.93±0.10,差异有统计学意义(t=3.78、4.28,P<0.05);2.P25蛋白在17日龄的RCS大鼠及RCS-rdy+大鼠的视网膜组织中均未检测到,但在25日龄和35日龄的RCS大鼠视网膜组织中表达水平为0.30±0.003、0.23±0.004,明显高于RCS-rdy+大鼠的0.04±0.004和0.07±0.004,差异有统计学意义(t=121.81、77.51,P<0.01);3.Cdk5蛋白在各日龄的RCS大鼠视网膜组织中表达水平与RCS-rdy+大鼠相比差异均无统计学意义(t=-0.60、0.19、1.62,P>0.05);4.Cdk5/P25激酶活性在17日龄的RCS大鼠和RCS-rdy+大鼠的视网膜组织中无明显统计学差异(P>0.05),25日龄和35日龄的RCS大鼠视网膜组织中Cdk5/P25激酶活性分别为0.00583±0.000527、0.00560±0.00043,明显高于RCS-rdy+大鼠的0.00385±0.000288和0.00320±0.000681,差异有统计学意义(t=8.07、5.97,P<0.01);5.25日龄和35日龄RCS大鼠视网膜组织中tau蛋白磷酸化水平明显高于RCS-rdy+大鼠,差异均有统计学意义(t=4.71、3.17,P<0.05)。结论RCS大鼠视网膜组织中Cdk5/P25激酶活性与P25蛋白表达水平和tau蛋白磷酸化水平基本一致,提示P25表达增加可能诱导了Cdk5/P25激酶活性升高,并通过磷酸化其作用底物引起视网膜细胞凋亡。过度激活的Cdk5/P25可能与视网膜色素变性疾病的发病有关。
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