【摘 要】
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[目的]观察养精胶囊提取液对GC-1细胞增殖的影响,并探讨其具体的作用机制。[方法]以体外小鼠精原细胞系GC-1细胞培养为模型,用无血清培养液诱导GC-1细胞凋亡,继而加入养精胶
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[目的]观察养精胶囊提取液对GC-1细胞增殖的影响,并探讨其具体的作用机制。[方法]以体外小鼠精原细胞系GC-1细胞培养为模型,用无血清培养液诱导GC-1细胞凋亡,继而加入养精胶囊提取液(0.01-1mg/mL)作用后,用MTT法检测细胞的活性；用流式细胞仪检测细胞周期；实时荧光定量PCR法和Western blot法检测OCT4和PLZF的mRNA和蛋白质的表达；利用GFRal siRNA和LY294002探究其作用机制；通过流式细胞仪检测细胞凋亡；实时荧光定量PCR法和Western blot法检测caspase-3的表达。[结果]养精胶囊提取液加入GC-1细胞后,能够显著增加细胞的活力；能降低G0/G1期细胞比例,增加S期细胞比例；OCT4和PLZF的mRNA和蛋白质的表达水平增加；使用GFRal siRNA和LY294002处理后,明显抑制了养精胶囊提取液对GC-1细胞的增殖,降低了养精胶囊提取液对OCT4和PLZF的mRNA和蛋白质的表达；能抑制GC-1细胞的凋亡,下降细胞内caspase-3的mRNA和蛋白质的表达。[结论]养精胶囊提取液能促进GC-1细胞的增殖。通过结合GFRal,养精胶囊提取液能引发PI3K/AKT通路的激活,最终导致GC-1细胞的增殖,并且抑制细胞的凋亡。
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