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雷公藤甲素(TP)是从卫矛科雷公藤中提取到的一种环氧二萜内酯,具有显著的抗炎免疫抑制活性,它通过强力抑制促炎症细胞因子如TNF-α的表达水平以及阻断NF-κB信号通路,从而抑制NO的合成和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达来发挥抗炎和免疫抑制活性;但是TP本身毒性较大、水溶性差、治疗窗窄,这些缺点极大地限制了它在临床上的应用。药剂学的多种剂型改造也未能解决这些问题。本文采用精准化学修饰手段在TP的母核中引入NOS特异性底物的类似基团:精氨酸类似物、2-氨基-吡啶基团,设计并合成了两类TP衍生物:氨基酸系列衍生物(TR-X)以及氨基吡啶类衍生物(TRN-X)。以提高TP的免疫抑制靶向性和生物利用度,从而达到降低毒性的目的,研究内容包括以下几个方面:一、TR-X系列衍生物,以TP为原料,首先与琥珀酸酐缩合得到TP琥珀酸酯(TR),TR在HATU/DIPEA缩合体系下与无氨基保护基的氨基酸一锅法合成目标化合物。L-精氨酸甲酯衍生物(TR-1),收率92%;L-精氨酸衍生物(TR-2),收率94%;N~ω-硝基-L-精氨酸甲酯衍生物(TR-3),收率94%;N~ω-硝基-L-精氨酸衍生物(TR-4),收率89%;L-瓜氨酸衍生物(TR-5),收率93%;L-赖氨酸衍生物(TR-6),收率91%;L-赖氨酸甲酯衍生物(TR-7),收率89%;L-鸟氨酸衍生物(TR-8),收率94%;L-鸟氨酸甲酯衍生物(TR-9),收率93%。二、TRN系列衍生物,TR在PyBoP/NMM缩合体系下,与2-氨基吡啶类化合物一步缩合得到TRN系列衍生物;2-氨基吡啶衍生物(TRN-1),收率76%;4-甲基-2-氨基-吡啶衍生物(TRN-2),收率83%;4-乙基-2-氨基-吡啶衍生物(TRN-3),收率72%。三、建立HPLC法测定目标化合物的分析方法,并对稳定性进行初步考察。确定各化合物的紫外最大吸收波长,其中TR-X系列确定以218 nm为检测波长、TRN系列以256 nm为检测波长,选用极性色谱柱以乙腈/甲醇-磷酸盐缓冲体系为流动相确定TR-X系列衍生物的HPLC检测条件,以乙腈-水为流动相检测TRN系列衍生物,各目标化合物HPLC检测结果符合要求。考察目标化合物分别在流动相中的稳定性,TR-X系列衍生物在72 h内保持稳定;TRN系列衍生物在10 d内保持稳定。四、以DNFB致敏的BALB/C小鼠迟发性超敏反应模型,每个目标化合物设置高剂量(5μg/kg)、中剂量(1μg/kg)、低剂量(0.2μg/kg)三个水平腹腔注射给药,阳性对照为雷公藤甲素,剂量水平与试样一致,阴性对照组为生理盐水(剂量10 mL/kg),耳肿胀度为评价指标,测定TR-X、TRN系列衍生物的抗炎活性。初步抗炎活性实验结果表明,TR-3、TR-5、TR-8、TR-9、TRN-3的三种剂量水平抗炎效果均优于相应的阳性对照,其中TR-8具有明显优势且具有量效关系,进一步活性评价正在进行。