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本文在南疆采集蚊虫和白蛉标本进行病毒分离鉴定；在南北疆广泛地域范围内采集蜱标本进行多种虫媒病毒的分子生物学检测，对了解当地虫媒病毒分布，指导病毒性疾病的预防控制十分重要。
一．南疆蚊和白蛉病毒分离鉴定。2005年7～8月在南疆喀什地区喀什市郊、伽师县采集13,491只蚊虫标本，在喀什地区喀什市郊、疏附县和克孜勒地区阿图什市郊采集4,566只白蛉标本，蚊虫标本分装为130管，白蛉标本分装为41管，将标本在液氮中保存，用干冰运输至本室，转入液氮中保存，分批研磨进行病毒分离。经过在C6/36和Vero细胞上连续3次传代，白蛉标本中没有分离到任何病毒，蚊虫标本中分离到42个在细胞上发生规律病变的病毒分离物，分离率32.31％。经过对不同月份、采集地、生境进行分析发现：(1)7月份蚊虫标本病毒分离率高于8月份蚊虫标本病毒分离率；(2)喀什市郊采集的蚊虫标本病毒分离率高于伽师县采集的蚊虫标本病毒分离率；(3)病毒都是从人畜活动频繁的人房、畜圈、果园采集的蚊虫标本中分离的，瓜地和林地采集的蚊虫标本中没有获得病毒分离物。
对42个病毒分离物从细胞病变、核酸电泳2个方面进行初步鉴定。42个病毒分离物的细胞病变分为5个类型，其中属于第二类型细胞病变的最多，共27个。对42个病毒分离物提取RNA进行PAGE检测，其中27个病毒分离物显示相同的12节段dsRNA带型，此外发现1个病毒分离物显示10节段dsRNA带型。对其余病毒分离物提取DNA进行琼脂糖凝胶电泳检测，发现其中5个病毒分离物有大小约4kb的DNA条带。余下9个病毒分离物在初步鉴定中没有获得有意义的分类信息。
在明确42个病毒分离物大致分类情况的基础上，对各类病毒分离物进行进一步研究，以深入了解其分类地位和分子生物学特征。
1．十二节段dsRNA病毒的PAGE带型呈现6-5-1分布，负染电镜观察显示完整病毒颗粒呈球形，无包膜，平均直径约55nm，壳粒结构清晰可见。血清学试验与LNv多克隆抗体呈阳性反应。对所有27个此类病毒测定第10和12基因片段核酸序列，进行同源性比较和系统进化分析，结果显示所有27个此类病毒均属辽宁病毒(Liaoning virus，LNv)，并在进化上分为若干亚群，显示一定的多样性。这是首次从我国新疆分离到该类病毒。
2．十节段dsRNA病毒的负染电镜观察显示完整病毒颗粒呈球形，无包膜，平均直径约60nm，单层衣壳，衣壳内有一个中央核，壳粒结构不及上述十二节段dsRNA病毒明显。该病毒的dsRNA基因组PAGE带型呈4-2-3-1分布。其第10基因片段推导氨基酸序列的同源性比较和系统进化分析，发现该病毒属细胞质多形性病毒(Cytoplasmic polyhedrosis virus，CPV)，可能是一种新型细胞质多形性病毒。
3．对0507JS8等DNA病毒的负染电镜观察显示完整病毒颗粒呈二十面立体对称，无包膜，平均直径约20nm。测定了此类病毒分离物编码区的全部序列和非编码区的部分序列，对其结构蛋白和非结构蛋白的核酸序列和氨基酸序列分别进行同源性比较和系统进化分析，结果显示这些DNA病毒是一类新的Densovirus，其衣壳蛋白基因的核酸和推导氨基酸序列变异较大。
4．剩余9个病毒分离物分类地位不明确，对其中部分病毒分离物采用负染电镜观察到一类相同的病毒颗粒，呈典型的二十面立体对称，无包膜，平均直径约70nm，壳粒结构明显，目前正在进一步鉴定中。
二．新疆蜱传虫媒病毒的分子生物学检测。
2004年在南疆23个采集地采集蜱标本5,045只、2005年在北疆8个采集地采集蜱标本764只，提取RNA，经随机六聚体引物逆转录生成cDNA，采用黄病毒科、内罗毕病毒属、加利福尼亚血清组、克里米亚刚果出血热病毒等多对广谱和特异引物进行PCR扩增。2004年巴楚县采集的蜱标本建立的cDNA中检测到内罗毕病毒属克里米亚刚果出血热病毒核酸，其他采集地采集的蜱标本建立的cDNA检测结果均为阴性，结果表明新疆依然是新疆出血热的自然疫源地，但是新疆蜱传虫媒病毒的种类和分布仍然较为有限。
三．其它。
2005年在贵州6个县市采集蚊虫标本11，280只，2006年在广西3个县采集蚊虫标本3,093只。从贵州蚊虫标本中分离到10个在C6/36细胞上病变而在BHK和Vero细胞上不病变的病毒分离物。其中5个经核酸电泳证实为DNA病毒。从广西蚊虫标本中分离到8个病毒分离物，其中有3个对C6/36细胞和BHK、Vero细胞都致病变，血清学试验和RT-PCR检测证实为乙脑病毒，另外5个仅对C6/36细胞致病变，对BHK和Vero细胞不致病变。贵州和广西除DNA病毒和乙脑病毒以外的10个病毒分离物经核酸电泳排除dsRNA/DNA病毒，经血清学和RT-PCR检测排除甲病毒属、黄病毒科、内罗毕病毒属、加利福尼亚血清组、版纳和辽宁病毒。
本研究首次在南疆喀什地区采集蚊虫和白蛉标本进行病毒分离鉴定，结果当地白蛉标本中未分离到病毒，蚊虫标本病毒分离率较高，分离并鉴定了LNV、CPV、DNV等病毒，该结果揭示了当地蚊传病毒的多样性，提示当地可能存在蚊传病毒性疾病，对当地病毒性疾病的预防控制有重要的指导意义。本研究首次在新疆31个采集地采集蜱标本进行多种蜱传虫媒病毒分子生物学检测，该研究结果对全面了解新疆蜱传虫媒病毒流行情况和指导新疆蜱传病毒性疾病的预防和控制有重要意义。此次在南疆巴楚县蜱标本中检测到新疆出血热病毒，说明新疆依然是新疆出血热的自然疫源地，对其它蜱传病毒性疾病在新疆存在与否尚需结合其它技术手段加以验证，因此在新疆持续进行蜱传虫媒病毒监测仍然十分必要。