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第一部分肝细胞癌中关键基因与micro RNA的鉴别和交互作用的生物信息学分析目的:鉴别促进HCC发生发展的关键基因和miRNA及其潜在的分子机制。方法:从GEO数据库分别下载包含mRNA和miRNA表达谱的微阵列数据集GSE22058,GSE25097和GSE57958,并使用GEO2R进行癌及癌旁组织基因差异性分析。使用DAVID数据库对差异基因进行功能和通路富集分析。使用Cytoscape软件构建PPI网络。最后,使用miRDB预测差异表达的micro RNA的靶基因。结果:通过分析得到115个DEGs,其中包括52个上调基因和63个下调基因。功能和通路富集分析提示上调基因主要富集于染色体分离和细胞分裂过程,而下调基因主要参与补体激活、蛋白激活级联、羧酸代谢过程、含氧酸代谢过程及免疫反应。通过PPI网络分析筛选18个核心基因,其中ESR1与FOXO1、CXCL12和GNAO1具有密切的相互作用。同时,分析得到64个DEMs,其中hsa-mir-18a和hsa-mir-221等5种miRNA可能对ESR1有靶向调控作用。结论:ESR1及CXCL12等DEGs与has-mir-221等DEMs的相互作用可能在HCC的发生发展中起重要作用,这可能为HCC患者的诊断和治疗提供新的线索。第二部分EDNRB基因对肝癌细胞株SMMC-7721及Huh7的迁移和侵袭能力的影响目的:探讨EDNRB基因对人肝癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法:应用实时荧光定量PCR和Western blot法检测EDNRB基因mRNA和蛋白在人肝癌细胞株(SMMC-7721和Huh7),人肝细胞株LO2以及HCC组织及其癌旁的相应组织中的表达情况。通过慢病毒转染构建稳定过表达EDNRB基因的细胞株SMMC-7721-E和Huh7-E,应用CCK-8法及Transwell小室法分别检测EDNRB基因对肝癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果:EDNRB mRNA在SMMC-7721和Huh7细胞中低于LO2细胞;HCC组织中EDNRB mRNA的表达水平低于相匹配的癌旁组织(p<0.01)。SMMC-7721和Huh7细胞中EDNRB蛋白表达低于LO2细胞;HCC组织中EDNRB蛋白的表达低于其相匹配的癌旁组织(p<0.01)。EDNRB基因过表达对SMMC-7721和Huh7细胞的增殖无显著影响(p值均>0.05),但能抑制其迁移和侵袭(p值均<0.01)。结论:HCC中EDNRB基因的表达显著下调。EDNRB基因可抑制人肝癌细胞的迁移及侵袭。