PDCD5蛋白协同顺铂对前列腺癌DU145细胞凋亡影响的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sarnimoon
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目的探讨程序性细胞死亡基因5(PDCD5)对顺铂诱导人前列腺癌DU145细胞凋亡以及细胞凋亡相关蛋白表达的影响。  方法本实验首先应用westernblot方法检测PDCD5在不同前列腺癌细胞中的表达情况;其次建立稳定过表达PDCD5的前列腺癌细胞系,命名为DU/PDCD5;第三,CCK-8法检测顺铂对DU145细胞生长增殖的抑制作用,并筛选出顺铂浓度为10和25μmol/L进行下面实验;最后通过CCK-8法、流式细胞仪和透射电镜检测10和25μmol/L浓度的顺铂对DU/PDCD5细胞增殖和凋亡的影响,以及利用western blot方法检测PDCD5联合顺铂对凋亡相关基因表达的影响。  结果研究结果显示,PDCD5在前列腺癌细胞中均有表达,且在DU145细胞中表达相对较低;本研究成功构建了稳定过表达PDCD5的前列腺癌细胞系(DU/PDCD5),且与对照组相比,PDCD5对细胞的增殖无明显影响,而顺铂对DU145细胞的增殖有抑制作用,且呈时间-剂量依赖性;与转染空质粒组(DU/MOCK)相比,不同浓度的顺铂能以时间.剂量依赖性显著抑制DU/PDCD5细胞增殖;流式细胞仪检测结果显示PDCD5联合顺铂(浓度为25μmol/L)能显著促进细胞凋亡;透射电镜观察也证实PDCD5联合顺铂使细胞出现明显的凋亡现象;Western blot结果显示,顺铂联合PDCD5能显著降低Bcl-2的表达,而Bax的表达明显升高。  结论 PDCD5能够增强顺铂对前列腺癌DU145细胞凋亡的诱导作用;并且PDCD5和顺铂二者联合作用促进前列腺癌DU145细胞发生凋亡的机制之一是通过降低Bcl-2和升高Bax表达实现的。
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