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目的:通过观察DC-CIK细胞联合吉非替尼对EGFR-T790M突变的肺腺癌H1975细胞增殖及EGFR/AKT/m TOR信号通路相关蛋白表达的影响,探索DC-CIK细胞联合吉非替尼对肺腺癌H1975细胞的影响及可能的机制,了解DC-CIK细胞能否逆转肺腺癌H1975细胞对吉非替尼的耐药性,为解决EGFR-TKIs治疗后出现的获得性耐药问题提供实验基础和理论依据。方法:取健康人外周血中的单个核细胞,于体外培养、诱导为成熟的DC细胞和CIK细胞,运用流式细胞技术检测DC细胞及CIK细胞培养前后的表型变化;以携带EGFR-T790M突变的肺腺癌H1975细胞为靶细胞,MTT法检测不同浓度吉非替尼、不同效靶比DC-CIK细胞及二者联合应用下对肺腺癌H1975细胞增殖的影响;免疫印迹法检测对照组、吉非替尼组、DC-CIK细胞组及DC-CIK细胞联合吉非替尼组p-EGFR、p-AKT、p-m TOR及β-actin的表达。结果:1.体外诱导培养至第9天的DC细胞,其表型CD40+、CD80+、CD86+和HLA-DR+相对于第0天的表达率明显升高:(72.97±4.98)%vs(14.13±4.17)%、(70.23±3.95)%vs(0.43±0.06)%、(83.23±3.00)%vs(14.43±0.64)%和(90.87±0.42)%vs(29.40±0.62)%,表明诱导的DC细胞已成熟;2.体外培养、诱导的CIK细胞,其CD3+、CD8+、CD3+CD8+和CD3+CD56+表型的表达率随培养时间的延长逐渐升高;与DC细胞共培养至第14天的CIK细胞,CD3+CD8+细胞和CD3+CD56+细胞比例分别达(81.50±0.7)%、(22.50±1.64)%,与单独培养至第14天的CIK细胞[(72.90±1.56)%、(16.63±0.83)%]相比,差异具有统计学意义(P<0.05);3.随着效靶比增高,DC-CIK细胞对肺腺癌H1975细胞的杀伤作用逐渐增强,效靶比为2.5:1、5:1、10:1、20:1和40:1时的抑制率分别为(27.78±1.36)%、(36.92±2.34)%、(44.65±2.61)%、(58.28±1.21)及(78.63±1.60)%,各组间差异具有统计学意义(P<0.05);4.各联合组对肺腺癌H1975细胞的杀伤作用均较单用组的强,各组间差异具有统计学意义(P<0.05),二者的联合效应值(Q值)均在0.85-1.15之间;5.免疫印迹法检测结果表明:吉非替尼组与对照组相比,EGFR/AKT/m TOR信号通路相关蛋白磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05);DC-CIK细胞组较对照组,其p-EGFR、p-AKT、p-m TOR的表达均明显下降(P<0.05);DC-CIK细胞联合吉非替尼组与DC-CIK细胞组相比,p-EGFR、p-AKT、p-m TOR的表达进一步降低(P<0.05)。结论:1、随着效靶比的增高,DC-CIK细胞杀伤肺腺癌H1975细胞的作用逐渐增强,DC-CIK细胞与吉非替尼的联合效应表现为相加作用;2、DC-CIK细胞逆转吉非替尼耐药、恢复肺腺癌H1975细胞对吉非替尼的敏感性可能与其抑制EGFR/AKT/m TOR信号通路相关蛋白的活化有关。