【摘 要】
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目的 采用骨形态剂量学、骨生物力学、免疫组织化学、细胞共转梁的方法,探讨新型雌激素——派嗪雌酚酮对生长期小鼠骨代谢的影响,及其对性腺、生殖系统的副作用.方法 对骨代谢
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目的 采用骨形态剂量学、骨生物力学、免疫组织化学、细胞共转梁的方法,探讨新型雌激素——派嗪雌酚酮对生长期小鼠骨代谢的影响,及其对性腺、生殖系统的副作用.方法 对骨代谢的影响休内实验:70只6周龄普通级KM小鼠,体重(30-35)g.随机分成七组:①基础对照组(Basal),②正常对照组(Sham),③去卵巢模型组(Ovx),④去卵巢+哌嗪雌酚酮低剂组(0.5mg/kg/d),⑤去卵巢+哌嗪雌酚酮中剂组(lmg/kg/d)和,⑥去卵巢+哌嗪雌酚酮高剂组(2mg/kg/d),⑦去卵巢+雌酚酮组(0.71mg/kg/d),连续灌胃给药42d.所有小鼠于处死前的第12d、11d和第3d、2d分别皮下注射盐酸四环素35mg/kg和钙黄绿素7mg/kg.右心室抽血处死后测量:①左侧胫骨上段、中段不脱钙骨制片行骨形态计量学测量;②左侧股骨用于生物力学检测及骨相关指标的测定;③右侧胫骨和股骨脱钙后,制成石蜡切片行胶原染色和免疫组化染色.体外实验:使用流式细胞仪应用免疫荧光法观察哌嗪雌酚酮对体外培养的成骨细胞雌激素受体表达的影响.对其他组织器官的影响:体内实验结束时,称取体内重要脏器及子宫湿重,以及血清雌二醇、骨钙素检测(为观察哌嗪雌酚酮对重要内脏器官、子宫及血清相关指标的影响);子宫制成石蜡切片行组织学观察;体外通过质粒和报告基因共转染方法观测哌嗪雌酚酮在乳腺癌细胞系中的信号途径.
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