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目的:观察IPI-926对人结肠癌HT-29细胞增殖作用及其对Hedgehog(Hh)信号通路因子表达的影响,探讨IPI-926对大肠癌的作用及其作用机制,为IPI-926治疗结直肠癌提供科学依据和指导。方法:用PRMI-1640培养基常规培养人结肠癌HT-29细胞,再将HT-29细胞随机分为不同浓度IPI-926(10、20、30 nmol/L)的实验组和对照组(以加入空白培养基作为IPI-926的空白对照组),将实验组及对照组HT-29细胞分别培养72 h,用倒置显微镜和四甲基偶氮唑蓝(MTT)法分别观察各组大肠癌HT-29细胞生长情况及其HT-29细胞抑制率;RT-PCR(即实时荧光定量PCR)和Western blotting分别检测各组培养72 h后Hh信号通路靶基因的Shh、Ptch、Smo和Gli-1 m RNA及其相关蛋白的表达。结果:1.培养结果发现:对照组HT-29细胞生长良好,呈贴壁生长,胞体呈圆形、椭圆形、类三角形,细胞结构完整,胞质均匀,核仁清楚;而用不同浓度IPI-926(10、20、30 nmol/L)处理的HT-29细胞密度均下降,并且随着药物浓度的增加,细胞密度及其形态变化越明显;研究发现,多数细胞形态呈现不规则、不对称生长,细胞凋亡增多,贴壁细胞减少,漂浮于溶液中,并可见大量的散在细胞碎片。2.MTT法结果:10、20、30 nmol/L浓度的IPI-926对人结肠癌细胞HT-29抑制率分别为17.23%±1.32%、38.34%±1.82%和75.81%±3.43%,随着IPI-926浓度的增大,HT-29的抑制率越高,组间差异有显著性意义(F=60.290,P=0.000)。3.RT-PCR及Western blotting检测结果:当IPI-926浓度为10nmol/L时Hh信号通路因子Shh、Ptch和Smo的m RNA及其蛋白表达与空白对照组比较差异无统计学意义(t值分别为0.612、0.548、1.039,p值均大于0.05),而两组中的Gli-1表达差异明显(t=3.674,p=0.021)。当IPI-926浓度为20nmol/L和30nmol/L时,Shh、Ptch、Smo和Gli-1的m RNA及其蛋白表达均比空白对照和10nmol/L组明显下调,差异具有统计学意义(t=44.929,P=0.000;t=22.500,P=0.000;t=33.633,p=0.000;t=18.558,p=0.000),并且IPI-926浓度为30nmol/L时的Shh、Ptch、Smo和Gli-1的表达明显高于20nmol/L时的m RNA表达(t=14.078,P=0.000;t=17.526,P=0.000;t=6.124,p=0.004;t=6.725,p=0.003)。结论:当IPI-926浓度超过20 nmol/L时,可有效地抑制人结肠癌HT-29细胞增殖,且随着IPI-926浓度的升高,其抑制率越高;其机制可能与Hh信号通路靶基因的Shh、Ptch、Smo和Gli-1 m RNA及其相关蛋白的表达抑制有关。