【摘 要】
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苦荬菜属植物盛产于我国东北和华北等地区,其中种类最多的倍半萜类化合物有显著的生物活性。特别是愈创木烷内酯型倍半萜类化合物。 本文利用大孔树脂柱层析,硅胶柱层析等方
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苦荬菜属植物盛产于我国东北和华北等地区,其中种类最多的倍半萜类化合物有显著的生物活性。特别是愈创木烷内酯型倍半萜类化合物。 本文利用大孔树脂柱层析,硅胶柱层析等方法从抱茎苦荬菜中分离得到含有两个活性愈创木烷内酯成分(内酯A和内酯B)的组合物。并建立了活性内酯含量测定的方法,即高效液相色谱法。对植物不同组织的活性内酯含量进行了测定,发现在植物根中的含量比在其它的部位高。 在活性内酯苷的基础上,将葡萄糖基水解掉,成为内酯苷元组合物,再通过乙酸乙酯萃取,氧化铝柱层析等方法将组合物分离,分别得到化合物Ⅰ和化合物Ⅱ。并通过谱学方法鉴定为内酯A苷元和内酯B苷元。 将分离得到的内酯苷组合物和其苷元组合物进行了体外抗肿瘤活性实验,利用MTT法,测定了内酯和苷元对三种肿瘤细胞(A375-S2,Hela和L929)的细胞毒活性。结果表明,内酯和苷元抑制肿瘤细胞的生长呈时间剂量依赖性。 本文用已知的倍半萜合成酶的保守氨基酸序列来设计简并引物,利用RT-PCR方法首次从抱茎苦荬菜中克隆了吉玛烷A合成酶(Germacrene A synthase)cDNA的部分序列并测序,大小为418bp,与其它几种不同来源的Germacrene A synthase的氨基酸序列进行同源性比较,一致性为89.64%。
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